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T25瓶細胞處理方法

發布時間:2020/8/27 15:28:16      閱讀次數:3624

T25瓶細胞處理方法

收到細胞后,檢查外包裝是否完整,細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時聯系。并進行以下操作:

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理,以穩定細胞狀態。

3. 預熱培養基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照保存40×,100×,200×各一張)。

5. ①若細胞密度較小,無菌操作,去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上,進行傳代。

②若細胞密度較大,達到80%以上,將細胞傳培養。

T25瓶細胞處理方法注:

培養瓶里的培養基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養基。由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天;同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養基。(這里是針對原來完全培養基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度)   收到細胞后如細胞狀態不佳或培養中遇到問題,煩請當天盡快聯系并提供圖片,以便售后處理。7天內反饋,細胞本身問題免費重發如人為原因導致可根據實際情況酌情處理;7天內未接到任何反饋視為合格,不予免費售后

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