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植物總酚(TP)試劑盒

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    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義

植物酚類物質具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營養(yǎng)價值和醫(yī)療保健作用而廣泛應用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領域

測定原理

堿性條件下,酚類物質將鎢鉬酸還原,產生藍色化合物,在760nm處有特征吸收峰,測760nm處的吸光值,即可得樣品總酚含量。

自備實驗用品及儀器

天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液:60%乙醇,自備。

試劑一:液體6mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體15mL×1瓶,4℃保存。

總酚提取

將樣本烘干至恒重,粉碎,過40目篩之后,稱取約0.1g,加入2.5mL提取液,60℃振蕩提取2h10000g25℃,離心10min,取上清,用提取液定容至2.5mL,待測。

測定操作表

 

 

對照管

測定管

樣本待測液µL

50

50

試劑一µL

 

250

混勻,25靜置2min

試劑二µL

250

250

H2OµL

700

450

混勻,25靜置10 min,對照管調零,1mL比色皿,測定A760

 

總酚含量計算公式

標準曲線:y = 5.615x+0.0012R2 = 0.9994

總酚含量(mg/g 干重)=A760-0.0012÷5.615×V÷(V÷V樣總×W)

 = 0.445×A760 0.0012 ÷W

V樣總:加入提取液體積,2.5mLV樣:反應中樣品體積,0.05mL W:樣品質量,g

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