發布時間：2021/3/23 10:04:21 閱讀次數：451
一、恒溫擴增技術的發展現狀 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 自1980年PCR技術發明后，基于PCR技術的核酸檢測迅速應用到臨床、食品、環境的檢測中，并成為核酸檢測的金標準。但PCR的檢測技術存在設備體積大、粗樣品耐受性差、反應時間長、靈敏度難以達到單copy等諸多缺點，已經難以滿足現代核酸檢測的要求：速度快（<30min）、超靈敏度（1-5copy/test）、大體積粗制樣品直檢（20-50%反應體積樣本量）、野外操作、簡單化操作等方面的指標。 在過去的20年中科學家一直嘗試通過恒溫擴增的方法來實現上述目標，這其中包括RCA(rolling circle amplification)、LAMP(loop-mediated isothermal amplification)、RPA(recombinase polymerase amplification)、NASBA(nucleic acid sequence based amplification)、SDA(strand displacement amplification)、HDA (helicase dependent amplification)、TMA(transcription-mediated amplification)等新型核酸恒溫擴增技術。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 在這些恒溫擴增技術中，以2000年首次報道的LAMP法尤為耀眼和引人關注，目前占據超過60%的恒溫檢測市場。核酸檢測對LAMP技術如此親賴，究其原因，得益于其它恒溫檢測技術難以達到LAMP技術的綜合性優勢： | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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二、建立核酸恒溫擴增技術平臺 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 于2014年啟動LAMP技術平臺的研發與搭建，基于分子工具酶研發經驗和蛋白質電子重構架技術，歷時6年時間打造出LAMP全系DNA聚合酶，包括：Bst2.0、Bst3.0、Bst4.0、Bst5.0、Bst7.0 DNA聚合酶。精心優化的反應體系，打造出性能卓越、高擴增效率、高特異性的IsoAmp Mix系列試劑，便于科研和診斷試劑的開發。上百萬次的測試，總結出更為高效的引物設計理念，為客戶提供免費的LAMP引物設計服務。多樣化的預混顯色試劑，滿足不同檢測需求，包括：可視化變色顯色（紅黃變色、OG變色、HNB變色）、濁度法、SYBR Green熒光法、恒溫熒光探針法、多重恒溫熒光探針法。除了提供頂級恒溫擴增用酶和預混mix試劑外，協助客戶進行恒溫擴增檢測試劑研發。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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三、 LAMP產品體系及應用 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1. 原料基礎用酶 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原料酶列表（全系提供含甘油和無甘油的酶版本） | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 2. 不同顯色方式的優缺點比較 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 3. 恒溫擴增預混Mix系列 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 關于LAMP核酸擴增的技術專利與商標：LAMP核酸擴增技術專利由日本榮研化學株式會社所擁有（專利號CN1420928A/CN1222614C）。除此外，LAMP商標也隸屬日本榮研化學株式會社。關于LAMP的商業化核酸檢測專利和商標授權使用，請聯系榮研生物科技(中國)有限公司。提供的恒溫擴增原料用酶與預混Mix系列產品，可用于LAMP擴增反應，但并不僅限于LAMP擴增，還可以進行RCA (Rolling Circle Amplification)、HDA(Helicase Dependent Amplification)、 SMAP（Smart Amplification Process）、CPA(Crossing Priming Amplification)等恒溫擴增方法。 |
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