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發布時間：2021/12/8 10:47:26 閱讀次數：797
基本信息：
平臺編號：zl-041505
啟動子: TrpC
復制子: pUC
終止子: TRPC
質粒分類: 絲狀真菌載體；RNAi基因沉默干擾質粒
質粒大小: 7056bp
原核抗性: Amp
篩選標記: Hyg
克隆菌株: DH5a
培養條件: 37度
表達宿主: 絲狀真菌
5'測序引物: 根據序列設計
3'測序引物: 根據序列設計
收到產品后，請先根據產品管壁標簽來判斷產品形式，并在擴增前準確查找該質粒菌株的抗性、感受態和培養溫度。質粒干粉（常溫運輸，存于-20度，90天保質期，請務必轉化挑單克隆培養）（本步驟僅作示例，非該產品的實際步驟）。
1.收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min，再加入20μl ddH2O去離子水溶解質粒；
2.取1支100ul感受態于冰上解凍10min，加入2ul質粒，再冰浴30min后，42℃熱激60s，不要攪動，再冰浴2min；
3.加入900μl無抗的LB液體培養基，180rpm震蕩37℃培養49min；
4.6000rpm離心5min，僅留100ul上清液重懸細菌沉淀，并涂布目標質粒抗性的LB平板上；
5.將平板正向培養1h，再倒置37℃培養14h。如果要求是30度則培養20h；（如果菌落過多，請將質粒稀釋后再轉化。如果無菌落，請加入10μl質粒離心全涂轉化）；
6.挑取單菌落至LB液體培養基中，加入對應抗生素，220rpm震蕩培養14h，根據實驗需要和質粒提取試劑盒說明書提取質粒。
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