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質(zhì)粒使用和保藏方法

發(fā)布時間：2021/12/8 10:49:43 閱讀次數(shù)：3883

質(zhì)粒使用和保藏方法

1簡要介紹
本公司提供的質(zhì)粒有三種類型：質(zhì)粒、甘油菌和穿刺菌�？蛻艨梢愿鶕�(jù)自己的喜好自由選擇其中一種。質(zhì)粒形式：冰袋運輸。長期保存條件-20度。儲存時間長，可達到5年之久。需要轉化感受態(tài)細胞擴增質(zhì)粒。甘油菌形式：常溫運輸。長期保存條件-80度。-80度條件下可以保存5年之久。可直接培育繁殖抽提質(zhì)粒。穿刺菌：常溫運輸，可用順豐航空快遞，到貨時間快。保存條件為4-10度。保存時間6個月�？芍苯优嘤敝吵樘豳|(zhì)粒。
2使用方法
質(zhì)粒形式使用方法：
（1）制備轉化感受態(tài)細胞；（2）熱擊法轉化感受態(tài)細胞；（3）挑取單克隆，培養(yǎng)單克隆并抽提質(zhì)粒。
甘油菌使用方法：
（1）配置LB培養(yǎng)基，LB液體培養(yǎng)基配方：胰蛋白胨(Tryptone)10g/L酵母提取物(Yeastextract)5g/L氯化鈉(NaCl)10g/LpH7.4，滅菌后，加入相應的抗生素；
（2）接種100ul至1-3ml的含抗生素的培養(yǎng)基中，37度，220rpm培養(yǎng)18小時以上；
（3）使用質(zhì)粒抽提試劑盒抽提質(zhì)粒。
穿刺菌使用方法：
（1）配置LB培養(yǎng)基，LB液體培養(yǎng)基配方：胰蛋白胨(Tryptone)10g/L酵母提取物(Yeastextract)5g/L氯化鈉(NaCl)10g/LpH7.4，滅菌后，加入相應的抗生素；
（2）接種100ul至1-3ml的含抗生素的培養(yǎng)基中，37度，220rpm培養(yǎng)18小時以上；
（3）使用質(zhì)粒抽提試劑盒抽提質(zhì)粒。
3菌種保藏方法：
注意要做好含質(zhì)粒的菌種保藏工作，保存方法為甘油菌形式，-80度保藏。