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質粒使用和保藏方法

發布時間：2021/12/8 10:51:36 閱讀次數：4601

質粒使用和保藏方法

1簡要介紹
本公司提供的質粒有三種類型：質粒、甘油菌和穿刺菌。客戶可以根據自己的喜好自由選擇其中一種。質粒形式：冰袋運輸。長期保存條件-20度。儲存時間長，可達到5年之久。需要轉化感受態細胞擴增質粒。甘油菌形式：常溫運輸。長期保存條件-80度。-80度條件下可以保存5年之久。可直接培育繁殖抽提質粒。穿刺菌：常溫運輸，可用順豐航空快遞，到貨時間快。保存條件為4-10度。保存時間6個月。可直接培育繁殖抽提質粒。
2使用方法
質粒形式使用方法：
（1）制備轉化感受態細胞；（2）熱擊法轉化感受態細胞；（3）挑取單克隆，培養單克隆并抽提質粒。
甘油菌使用方法：
（1）配置LB培養基，LB液體培養基配方：胰蛋白胨(Tryptone)10g/L酵母提取物(Yeastextract)5g/L氯化鈉(NaCl)10g/LpH7.4，滅菌后，加入相應的抗生素；
（2）接種100ul至1-3ml的含抗生素的培養基中，37度，220rpm培養18小時以上；
（3）使用質粒抽提試劑盒抽提質粒。
穿刺菌使用方法：
（1）配置LB培養基，LB液體培養基配方：胰蛋白胨(Tryptone)10g/L酵母提取物(Yeastextract)5g/L氯化鈉(NaCl)10g/LpH7.4，滅菌后，加入相應的抗生素；
（2）接種100ul至1-3ml的含抗生素的培養基中，37度，220rpm培養18小時以上；
（3）使用質粒抽提試劑盒抽提質粒。
3菌種保藏方法：
注意要做好含質粒的菌種保藏工作，保存方法為甘油菌形式，-80度保藏。