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細(xì)胞行為大賞之細(xì)胞遷移和細(xì)胞侵襲

發(fā)布時(shí)間:2021/12/15 9:52:07      閱讀次數(shù):794

 細(xì)胞遷移.png

 

細(xì)胞遷移是指細(xì)胞受到外來(lái)信號(hào)的刺激后,由一個(gè)地方遷移到另一個(gè)地方的特性。而細(xì)胞侵襲則是指細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞外基質(zhì)或者基底膜基質(zhì)從一個(gè)區(qū)域遷移到另一個(gè)區(qū)域的能力。經(jīng)常有人會(huì)分不清這兩者的區(qū)別,但是實(shí)際上二者有聯(lián)系也有區(qū)別。細(xì)胞遷移是在沒(méi)有阻力的情況下的細(xì)胞移動(dòng),但細(xì)胞侵襲是指細(xì)胞需要先裂解掉“阻力”(如細(xì)胞外基質(zhì),extracellular matrix,ECM)后才實(shí)現(xiàn)移動(dòng)的能力,所以本質(zhì)上,細(xì)胞侵襲是一種特殊的細(xì)胞遷移,侵襲細(xì)胞通常具有遷移能力,但并不是所有遷移細(xì)胞都具有侵襲性。

 

細(xì)胞遷移是正常細(xì)胞的基本功能之一,是機(jī)體正常生長(zhǎng)發(fā)育的生理過(guò)程,也是活細(xì)胞普遍存在的一種運(yùn)動(dòng)形式。胚胎發(fā)育、血管生成、傷口愈合、免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、動(dòng)脈粥樣硬化、癌癥轉(zhuǎn)移等過(guò)程中都涉及細(xì)胞遷移。因此通過(guò)對(duì)細(xì)胞遷移(包括細(xì)胞侵襲)的研究,對(duì)阻止癌癥轉(zhuǎn)移、異體植皮等醫(yī)學(xué)應(yīng)用方面具有一定意義。

 

細(xì)胞遷移分析通常在細(xì)胞培養(yǎng)物中開(kāi)展,目前流行的方法主要有:Boyden小室(跨膜法)、間隙封閉分析(gap-closure assay)等。

 

Boyden小室法:

 

Boyden小室法.png

 

Boyden小室由上、下兩室組成,中間以微孔濾膜隔開(kāi)。將趨化劑加入下室中,形成梯度,而細(xì)胞接種在上室中。細(xì)胞放置在其中一個(gè)室內(nèi),或接種在膜的一面,將要研究的趨化試劑或抑制劑放置于另一室內(nèi)。受趨化劑影響,細(xì)胞會(huì)穿過(guò)膜上的微孔從上室移動(dòng)到下室。之后,通過(guò)固定、染色和觀察,穿過(guò)膜的細(xì)胞數(shù)就可以在顯微鏡下進(jìn)行檢測(cè)。這種分析方法的優(yōu)點(diǎn)是可用于分析貼壁或不貼壁細(xì)胞,并可檢測(cè)趨化梯度下的遷移。缺點(diǎn)是趨化試劑的濃度梯度不可知且是變化的,所以這種分析傳統(tǒng)上大多只用于終點(diǎn)法,不適用于實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)遷移。需要注意的是,我們必須選擇比細(xì)胞直徑略小的濾膜孔徑。如果細(xì)胞在梯度的刺激下,它們會(huì)拼命擠過(guò)去。一般來(lái)說(shuō),3um的孔徑適合白細(xì)胞或淋巴細(xì)胞遷移。5um的孔徑適合成纖維細(xì)胞或癌細(xì)胞,也適合單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。而8um的孔徑適合大多數(shù)細(xì)胞,這一孔徑支持大多數(shù)上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的最佳遷移,但不適合淋巴細(xì)胞。

 

作為細(xì)胞學(xué)分析檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)商,Cell BioLabs為您提供各種孔徑以及經(jīng)過(guò)不同處理的聚碳酸酯膜的細(xì)胞遷移檢測(cè)方案。

遷移類(lèi)型 特點(diǎn) 細(xì)胞類(lèi)型 孔徑 包被物 貨號(hào)
趨化性 細(xì)胞向周?chē)h(huán)境中的趨化因子遷移 中性粒細(xì)胞/白細(xì)胞 3um 無(wú) CBA-103
淋巴細(xì)胞/單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞 5um 無(wú) CBA-102
成纖維細(xì)胞/內(nèi)皮細(xì)胞/上皮細(xì)胞/腫瘤細(xì)胞 8um 無(wú) CBA-100
星形膠質(zhì)細(xì)胞/緩慢移動(dòng)的細(xì)胞 12um 無(wú) CBA-107
趨觸性 細(xì)胞沿細(xì)胞外基質(zhì)的梯度方向遷移 成纖維細(xì)胞/內(nèi)皮細(xì)胞/上皮細(xì)胞 8um 膠原蛋白I(下層) CBA-100-COL
纖連蛋白(下層) CBA-100-FN
細(xì)胞轉(zhuǎn)移 細(xì)胞通過(guò)血管內(nèi)皮向趨化因子的遷移 白細(xì)胞 3um 無(wú) CBA-212
腫瘤細(xì)胞 8um 無(wú) CBA-216

 

而在細(xì)胞侵襲中,細(xì)胞需要破壞或調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)。在Boyden分析中加入一層ECM蛋白,即可將細(xì)胞遷移分析轉(zhuǎn)換成侵襲分析,Cell BioLabs可提供包被不同ECM單組分及全組分ECM的細(xì)胞侵襲檢測(cè)試劑盒。

遷移類(lèi)型 特點(diǎn) 細(xì)胞類(lèi)型 孔徑 包被物 貨號(hào)

細(xì)胞侵襲
細(xì)胞需要降解ECM而進(jìn)行的遷移 成纖維細(xì)胞/內(nèi)皮細(xì)胞/上皮細(xì)胞/腫瘤細(xì)胞 8um ECM基質(zhì)(上層) CBA-110
膠原蛋白I(上層) CBA-110-COL
層粘連蛋白(上層) CBA-110-LN

 

間隙封閉分析

讓細(xì)胞在孔的底部圍繞一個(gè)阻止細(xì)胞生長(zhǎng)的區(qū)域(如在孔底部中央放置阻塞物)生長(zhǎng)。試驗(yàn)在移除阻塞物后開(kāi)始,可觀察單層細(xì)胞遷移到原先的空白區(qū)域中。優(yōu)點(diǎn)是可以對(duì)細(xì)胞遷移進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),避免與創(chuàng)傷相關(guān)的因子可能造成的復(fù)雜性。另外,可在細(xì)胞層上加一層基質(zhì),進(jìn)行3維細(xì)胞遷移的分析。這種方法操作簡(jiǎn)單且重復(fù)性好,以簡(jiǎn)單方便的形式精準(zhǔn)地監(jiān)則細(xì)胞遷移,既可用于終點(diǎn)法,也可用于實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)遷移的分析。缺點(diǎn)是這種方法不能分析不貼壁細(xì)胞及趨化梯度下的細(xì)胞遷移。

貨號(hào) 名稱(chēng) 包被物
CBA-125 Radius? 24-Well Cell Migration Assay 無(wú)
CBA-125-COL Radius? 24-Well Cell Migration Assay (Collagen I Coated) 膠原蛋白I
CBA-125-FN Radius? 24-Well Cell Migration Assay (Fibronectin Coated) 纖連蛋白
CBA-125-LN Radius? 24-Well Cell Migration Assay (Laminin Coated) 層粘連蛋白
CBA-125-ECM Radius? 24-Well Cell Migration Assay (ECM Array Coated) ECM基質(zhì)


間隙封閉分析.png

 


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