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發布時間：2022/1/5 8:45:42 閱讀次數：1123
Caco-2 (人結直腸腺癌細胞)分離自一位72歲男性直腸原位癌，人結腸癌Caco-2細胞系在標準培養條件下匯合后，自發分化為腸上皮樣細胞，是常用的腸癌細胞模型。 本文為大家介紹Caco-2細胞生長特性和常見問題解決策略。 生長特性:呈島狀生長 Cco-2細胞群的邊界光滑，視野中一個個細胞克隆如同海上小島一般。 空泡多 Caco-2細胞群中常常含有巨大的空泡，這是細胞本身的特性，屬于正常現象。 難消化 Caco-2細胞與細胞間連接緊密，使得細胞難以解離。通常加入胰酶后，細胞克隆的四周先飄起來，中間仍貼壁；隨后整片克隆脫落，但細胞與細胞間不會分散。消化時間為5-10分鐘，該細胞難以被吹散為單個細胞，當細胞能夠被吹散為小的細胞團塊，即可終止消化。 貼壁慢 Caco-2貼壁緩慢，在標準培養條件【MEM（含NEAA）＋20% FBS＋1% P/S】下，接種后約24~72小時完成貼壁。推薦接種后第三天再換液。 生長慢 Caco-2細胞傳代周期較長，這是因為Caco-2貼壁和生長都較為緩慢。按1:4傳代的情況下，約一周傳代一次。 常見問題 細胞不貼壁怎么辦？ Caco-2細胞培養基里添加的胎牛血清比例為20%，當血清比例降低，貼壁性下降時，補充胎牛血清至20%，繼續培養1-2天，細胞即可貼壁。檢查培養基是否偏堿（呈紫紅色），偏堿的培養基可能導致細胞無法貼壁 能否用DMEM培養基替代MEM培養基？ 可以。DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是在MEM培養基的基礎上研制的。Caco-2細胞在DMEM+20%FBS+1%P/S條件下生長狀態正常。 MEM中不含NEAA會怎樣？ 當用不含NEAA的MEM培養基時，Caco-2生長速度可能下降，漂浮細胞增多。 細胞消化不下來怎么辦？ 如果消化5-10分鐘，細胞部分脫落，另一部分仍然貼壁緊密，可以將脫落細胞轉移至離心管，向原瓶中加入新的胰酶，放入培養箱繼續消化剩余細胞，每隔1min拿出來觀察，直到細胞滑落。 漂浮細胞多怎么辦？ 有少量發亮的細胞漂浮或黏附在細胞克隆上，是正常的，隨后會進入克隆并正常生長。所以避免頻繁觀察細胞，可以減少漂浮細胞產生。 如果Caco-2細胞隨著培養過程，漂浮得越來越嚴重，甚至大塊兒飄起，就要檢查培養基成分、培養環境是否出現異常了。 注意事項 01 Caco-2細胞貼壁慢特別是剛復蘇時，一般2-3天貼壁 展開，會有空泡。 02 Caco-2細胞在傳代細胞中，注意消化散，否則難以貼壁。 03 成團生長，Caco-2細胞密度越大，表面空泡黑點越多。 04 一般Caco-2細胞長至80%傳代，細胞成片，其實密度很大。 05 Caco-2細胞生長太滿對細胞狀態影響嚴重，傳代后易碎，死亡。 06 Caco-2細胞生長時間越長，消化時間越長。 基本資料 Caco-2 (人結直腸腺癌細胞) 細胞別稱 CaCo-2; CACO-2; Caco 2; CACO 2; CACO2; CaCo2; CaCO2; Caco2; Caco-2/ATCC 組織來源 男；72歲；結腸，結直腸腺癌 生長特性 貼壁細胞 細胞形態 上皮細胞樣 生長培養基 MEM＋20% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:4 推薦換液頻率 48-72小時/次 凍存液 55% MEM+40%FBS+5%DMSO 溫馨提醒： 如果您想要了解或選購細胞系或者原代細胞，請點擊我要選購，有任何疑問也可以點擊右方的在線咨詢，專業技術人員將為您提供解答。
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