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收到的細胞脫落了?碎片多?黑點多?

發布時間:2022/3/4 8:35:35      閱讀次數:722

 科學研究中需要用到各種細胞系作為實驗模型,這些細胞系通?梢詮母鞔蠹毎麕飓@取。

而在收到細胞庫寄送來的常溫細胞時,常常會遇到一些問題,比如細胞脫落皺縮、有黑點。

這篇文章將幫助大家解決這些常見問題。

 收貨時,細胞脫落

01

有些細胞本身貼壁不牢,很容易脫落(如293系列,TM3,TM4,Raw264.7,原代內皮細胞,原代平滑肌細胞)。

另外,運輸過程中受到碰撞或氣溫過低,也可能導致細胞脫落。

處理辦法

① 脫落的細胞進行離心收集,并在離心管中消化。

② 仍然貼壁的細胞,按照常規方法加入胰酶或其他解離劑消化。

③ 再將消化好的脫落細胞和貼壁細胞混合,按比例接種到新的培養器皿中。

 收貨時,細胞皺縮

02

運輸過程中,路途顛簸加上溫度不穩定,常溫細胞會發生回縮。

處理辦法

放入培養箱靜置2-4小時,若4小時后仍然沒有伸展,延長靜置時間。注意,過夜靜置時,需倒出部分培養基,留5-10mL在瓶中,瓶蓋擰松透氣,保持氣體交換(L15培養體系除外)。

若有脫落細胞,需離心收集。

處理后第三天

(圖片由客戶提供,僅供學習參考)

收貨時,細胞黑點較多

03

當受到運輸環境影響時,細胞會發生應激反應,分泌活動增加,導致分泌蛋白增多,呈黑色圓球狀,分布無規律。

同時,路途中凋亡的細胞碎裂后將產生細胞碎片,為黑色或透明色,呈不規則狀,分布無規律。

另外,有些細胞本身分泌活動較強,培養時常伴隨黑點。

處理辦法

貼壁細胞放培養箱靜置2-4小時后,正常換液或傳代;

懸浮細胞800~1000rpm(約160~200g) 低速離心3min去除碎片。通常培養數天后,細胞狀態會逐漸穩定下來。


 

小貼士:遇到小黑點問題時,首先要排除微生物污染,再按以上辦法解決哦~

細胞碎片/分泌物和微生物污染的區別


 

_

細胞碎片/分泌物

微生物污染

形態

大小不一的黑色圓點,或不規則形狀

圓球狀或桿狀,

形態非常規則

是否運動

原地震動,布朗運動

或相對液體靜止

快速游動,快速轉圈或

相對液體靜止

分布情況

視野中分布無規律

視野中分布均勻

增長情況

無抗生素條件下

不增多或緩慢增多

無抗生素條件下

48-72小時內爆發式增多

 


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