當前位置:首頁>技術資訊
發布時間:2022/3/4 8:35:35 閱讀次數:722
科學研究中需要用到各種細胞系作為實驗模型,這些細胞系通?梢詮母鞔蠹毎麕飓@取。
而在收到細胞庫寄送來的常溫細胞時,常常會遇到一些問題,比如細胞脫落、皺縮、有黑點。 這篇文章將幫助大家解決這些常見問題。 收貨時,細胞脫落 01 有些細胞本身貼壁不牢,很容易脫落(如293系列,TM3,TM4,Raw264.7,原代內皮細胞,原代平滑肌細胞)。 另外,運輸過程中受到碰撞或氣溫過低,也可能導致細胞脫落。 處理辦法 ① 脫落的細胞進行離心收集,并在離心管中消化。 ② 仍然貼壁的細胞,按照常規方法加入胰酶或其他解離劑消化。 ③ 再將消化好的脫落細胞和貼壁細胞混合,按比例接種到新的培養器皿中。 收貨時,細胞皺縮 02 運輸過程中,路途顛簸加上溫度不穩定,常溫細胞會發生回縮。 處理辦法 放入培養箱靜置2-4小時,若4小時后仍然沒有伸展,延長靜置時間。注意,過夜靜置時,需倒出部分培養基,留5-10mL在瓶中,瓶蓋擰松透氣,保持氣體交換(L15培養體系除外)。 若有脫落細胞,需離心收集。 處理后第三天 (圖片由客戶提供,僅供學習參考) 收貨時,細胞黑點較多 03 當受到運輸環境影響時,細胞會發生應激反應,分泌活動增加,導致分泌蛋白增多,呈黑色圓球狀,分布無規律。 同時,路途中凋亡的細胞碎裂后將產生細胞碎片,為黑色或透明色,呈不規則狀,分布無規律。 另外,有些細胞本身分泌活動較強,培養時常伴隨黑點。 處理辦法 ★貼壁細胞放培養箱靜置2-4小時后,正常換液或傳代; ★懸浮細胞800~1000rpm(約160~200g) 低速離心3min去除碎片。通常培養數天后,細胞狀態會逐漸穩定下來。 小貼士:遇到小黑點問題時,首先要排除微生物污染,再按以上辦法解決哦~ 細胞碎片/分泌物和微生物污染的區別 細胞碎片/分泌物 微生物污染 形態 大小不一的黑色圓點,或不規則形狀 圓球狀或桿狀, 形態非常規則 是否運動 原地震動,布朗運動 或相對液體靜止 快速游動,快速轉圈或 相對液體靜止 分布情況 視野中分布無規律 視野中分布均勻 增長情況 無抗生素條件下 不增多或緩慢增多 無抗生素條件下 48-72小時內爆發式增多
掃碼咨詢微信客服
掃碼咨詢微信客服