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土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性檢測試劑盒說明書

發(fā)布時間:2022/8/8 12:12:47      閱讀次數:517

 注意:正式測定前請選擇 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。

貨號: YX-C-B934

規(guī)格: 50T/48S

產品內容:

試劑一:粉劑×2 瓶,臨用前每瓶加入 15mL 蒸餾水,用不完的試劑 4℃保存; 試劑二:液體 10mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:乙醚,4℃保存(自備)

重鉻酸鉀標準液:液體 10mL×1 瓶,重鉻酸鉀溶液2.55mmol/L,相當于 0.1mg/mL 紫色沒食子素溶液。

標準品稀釋:

0.5mol/L HCL 溶液將標準液稀釋至 0.10.050.0250.01250.006250.0031250mg/mL

產品說明:

S-PPO 主要來源于土壤微生物、植物根系分泌物及動植物殘體分解釋放,催化土壤中芳香族化合物氧化成醌,醌與土壤中蛋白質、氨基酸、糖類、礦物等物質反應生成有機質和色素,完成土壤芳香族化合物循環(huán),用于土壤環(huán)境修復。

S-PPO 能夠催化鄰苯三酚產生紫色沒食子素,后者在 430nm 有特征光吸收。

試驗中所需的儀器和試劑:

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL 比色皿、乙醚(不允許快遞、冰和蒸餾水。

操作步驟:

1、可見分光光度計預熱 30min 以上,調節(jié)波長至 430nm,試劑三調零。

2、標準曲線的建立:取 1mL 稀釋好的標準液于比色皿中在 430nm 處測定吸光值 A,根據吸光度x 和濃度(ymg/mL)做出標準曲線。

3、樣本測定表

試劑名稱

測定管

風干土樣(g

0.05

試劑一(μL

500

振蕩混勻,30℃恒溫培養(yǎng) 1h

試劑二(μL

200

試劑三(μL

1750

振蕩數次,室溫靜置 30min,取 1mL 上層液于 430nm 處測定吸光值 A


S-PPO 活性計算:

根據標準曲線,將樣品吸光值 Ax)帶入公式中,計算出樣品濃度 ymg/mL)。單位的定義:每天每 g 土樣中產生 1mg 紫色沒食子素定義為一個酶活力單位。

S-PPO  U/g 土樣  y×V 提取÷W÷T=840×yT  時間

1h=1/24dV 提取相:1.75mLW:樣品質量,0.05g


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