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紅細(xì)胞滲透脆性檢測試劑盒(比色法)

發(fā)布時間:2023/2/22 10:14:13      閱讀次數(shù):458

紅細(xì)胞滲透脆性檢測試劑盒(比色法)

  

產(chǎn)品簡介:

紅細(xì)胞(Red blood cell,RBC)也稱紅血球,是血液中數(shù)量最多的一種血細(xì)胞,脊椎動物體內(nèi)通過RBC運(yùn)送氧氣,RBC同時還具有免疫功能,在貧血檢查中可通過紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)來檢測紅細(xì)胞膜的缺陷。

雅吉生物紅細(xì)胞孵育滲透脆性檢測試劑盒(比色法)(Erythrocyte Incubated OsmoticFragility Assay Kit)檢測原理是將患者血液置于37℃孵育24h,使紅細(xì)胞代謝繼續(xù)進(jìn)行,由于葡萄糖的消耗,儲備的ATP減少,導(dǎo)致需要能量的紅細(xì)胞膜對陽離子的主動傳遞受阻,造成鈉離子在紅細(xì)胞內(nèi)聚集,細(xì)胞膨脹,孵育滲透脆性增加,某些有細(xì)胞膜缺陷以及某些酶缺陷的紅細(xì)胞的葡萄糖和ATP很快被耗盡時,孵育滲透脆性明顯增加,該實(shí)驗(yàn)被稱為紅細(xì)胞孵育滲透脆性試驗(yàn),主要用于檢測人、動物血液的紅細(xì)胞孵育滲透脆性,并計算紅細(xì)胞中性脆性(MCF)。 該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

 

產(chǎn)品組成:

名稱

50T

Storage

試劑(A):NaCl Phosphate Buffer

100ml

4℃

試劑(B):ddH2O

100ml

RT

 

自備材料:

1、小試管

2、分光光度計

3、比色杯

 

操作步驟(僅供參考):

1、取肝素抗凝血2ml ,分成2份,1份立即實(shí)驗(yàn),另1份密閉37C孵育24h后再作實(shí)驗(yàn)。

2、取小試管或恰當(dāng)容器,依次編號,按照下表稀釋成不同濃度。每次檢查應(yīng)設(shè)正常對照。

 

試管號

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

試劑A(ml)

3.4

3.0

2.8

2.6

2.4

2.2

2.0

1.8

1.6

1.4

1.2

0.8

0.4

試劑B(ml)

0.6

1

1.2

1.4

1.6

1.8

2.0

2.2

2.4

2.6

2.8

3.2

3.6

NACL濃度(g/L)

8.5

7.5

7.0

6.5

6.0

5.5

5.0

4.5

4.0

3.5

3.0

2.0

1.0

 

 

 

 

3、分別吸取40μl肝素抗凝血加入上述NaCI稀釋液中輕輕混勻,室溫(20°C)靜置30min。

4、將各管再次混勻1次,離心沉淀5min,取上清液。

5、用分光光度計檢測540nm波長,以NaCI Phosphate Buffer 作為空白管調(diào)零,測定

各溶血管的吸光度。

6、計算溶血百分率∶以1g/L NaCl完全溶血管的吸光度為100%,計算相應(yīng)氯化鈉濃度

的溶血百分率。溶血百分率(%)=各管吸光值/100%溶血管吸光值×100。

7、計算紅細(xì)胞中性脆性(MCF)∶以溶血百分率為縱坐標(biāo),以氯化鈉濃度為橫坐標(biāo),作溶血

曲線圖,即為紅細(xì)胞鹽水滲透脆性曲線。在曲線上,50%溶血的氯化鈉濃度為紅細(xì)胞中性脆性(MCF)。

 

參考區(qū)間︰

未孵育,50%溶血氯化鈉濃度

4.00~4.45g/L

37℃孵育24H,50%溶血氯化鈉濃度

4.46~5.9g/L

 

注意事項:

1、每次檢查應(yīng)設(shè)正常對照。

2、NaCl Phosphate Buffer pH值及溫度必須恒定,pH改變0.1或溫度改變5%,均可

使結(jié)果偏差0.01%。

3、NaCl Phosphate Buffer采用高純度氯化鈉配制,普通氯化鈉不宜采用。

4、NaCl Phosphate Buffer不要被酸堿污染,同時注意密閉保存。

5、血液樣品應(yīng)直接滴入液體,不宜沿管壁流入。

6、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

有效期12個月有效,4℃保存。

 


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