胰腺彈性蛋白酶ELISA用于定量測定胰腺人體糞便樣本中的彈性蛋白酶。在美國境內(nèi)用于體外診斷美國和加拿大作為診斷胰腺外分泌功能不全的輔助工具。

胰彈性蛋白酶ELISA（30-PANHU-E01）檢測原理：

該ELISA用于定量測定糞便中的胰蛋白酶。在第1次孵育步驟中，樣品中的胰蛋白酶與固定在微孔板表面的單克隆抗體結(jié)合。為了去除所有未結(jié)合的物質(zhì)，進(jìn)行洗滌步驟。在第二次孵育步驟中，加入一種過氧化物酶標(biāo)記的結(jié)合物（小鼠抗胰蛋白酶抗體），該結(jié)合物特異性識別已結(jié)合的胰蛋白酶。經(jīng)過另一次洗滌步驟以去除所有未結(jié)合的物質(zhì)后，固相與底物四甲基聯(lián)苯胺（TMB）孵育，TMB與過氧化物酶反應(yīng)。隨后加入酸性終止液以停止反應(yīng)。顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與胰蛋白酶的濃度成正比。通過使用標(biāo)準(zhǔn)品獲得的值生成吸光度單位（在450 nm處的光密度，OD）與濃度的劑量反應(yīng)曲線。

供應(yīng)的材料：

需要但未提供的材材料：

? 用于分發(fā)高達(dá)1000 ?L的精密移液器（帶一次性吸頭）

? 用于分發(fā)高達(dá)1000 ?L的可重復(fù)或多通道移液器

? 用于試劑準(zhǔn)備的量筒和移液器

? 用于試劑準(zhǔn)備的蒸餾水/去離子水

? 微孔板洗滌器或洗滌瓶

? 能夠以550轉(zhuǎn)/分鐘、2毫米軌道的微孔板振蕩器

? 微孔板讀取器

? 用于樣品準(zhǔn)備的漩渦混合器

? 覆蓋微孔板的箔片

? 計(jì)時(shí)器

胰彈性蛋白酶ELISA注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒組分中使用的人源材料經(jīng)過檢測，結(jié)果為人類免疫缺陷病毒（HIV）、乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）陰性。然而，出于安全原因，所有試劑盒組分應(yīng)被視為潛在的傳染性物質(zhì)。

2. 試劑盒中的試劑含有作為防腐劑的疊氮鈉或ProClin。疊氮鈉或ProClin對健康和環(huán)境有害。酶促顏色反應(yīng)的底物也可能引起皮膚和/或呼吸道刺激。必須避免與這些物質(zhì)接觸。可在ALPCO應(yīng)要求提供的安全數(shù)據(jù)表中找到進(jìn)一步的安全信息。

3. 終止液由稀釋后的硫酸組成，是一種強(qiáng)酸。盡管已經(jīng)稀釋，但仍需謹(jǐn)慎處理。它可能導(dǎo)致灼傷，應(yīng)戴手套、眼睛保護(hù)和適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服操作。任何溢出應(yīng)立即用大量水擦拭。不要吸入蒸汽，避免吸入。

4. 10倍濃縮洗滌緩沖液含有表面活性劑，如果接觸到眼睛，可能會(huì)引起嚴(yán)重的眼部刺激。

警告：引起嚴(yán)重的眼部刺激

如果進(jìn)入眼睛：用水小心沖洗幾分鐘。如果可能且容易的話，取出隱形眼鏡。繼續(xù)沖洗。如果眼部刺激持續(xù)，請尋求醫(yī)療建議/關(guān)注。

5. 避免與皮膚直接接觸。

6. 本產(chǎn)品不可內(nèi)服。使用本產(chǎn)品時(shí)，避免吃東西、喝水或吸煙。不要使用嘴部移液任何試劑。

9. 此試劑盒中的試劑是批次特定的，不得替換。

10. 不要使用試劑盒標(biāo)簽上標(biāo)明的過期日期之后的試劑。

11. 不建議對測試程序進(jìn)行變更，可能會(huì)影響測試結(jié)果。

儲存條件：

試劑盒應(yīng)儲存在2-8°C。如果儲存得當(dāng)，試劑盒在盒子標(biāo)簽上的過期日期前是穩(wěn)定的。

胰彈性蛋白酶ELISA試劑準(zhǔn)備：

所有試劑在使用前必須平衡至室溫。只準(zhǔn)備足夠使用的條數(shù)的試劑。體積小于100 μL的試劑在使用前應(yīng)離心，以避免體積損失。

控制品（1級和2級）和標(biāo)準(zhǔn)品以凍干形式提供，并在標(biāo)簽上標(biāo)明的有效期內(nèi)，在2-8°C下是穩(wěn)定的。重懸細(xì)節(jié)在特定批次的數(shù)據(jù)表中給出。重懸后的標(biāo)準(zhǔn)品和控制品不穩(wěn)定，無法儲存。

洗滌緩沖液濃縮液（10倍）在使用前必須用蒸餾或去離子水1:10稀釋（100 mL 洗滌緩沖液 + 900 mL 蒸餾/去離子水），并混合均勻。由于濃縮液中鹽濃度高，可能會(huì)有晶體出現(xiàn)。在使用前，晶體必須在室溫或37°C水浴中重新溶解。洗滌緩沖液在標(biāo)簽上標(biāo)明的有效期內(nèi)在2-8°C下是穩(wěn)定的。1倍工作洗滌液（1:10稀釋的洗滌緩沖液）可以在2-8°C下儲存在封閉的燒瓶中，有效期為1個(gè)月。

提取緩沖液濃縮液（2.5倍）在使用前必須用蒸餾或去離子水1:2.5稀釋（100 mL 提取緩沖液 + 150 mL 蒸餾/去離子水），混合均勻。由于濃縮液中鹽濃度高，可能會(huì)有晶體出現(xiàn)。在使用前，晶體必須在37°C水浴中重新溶解。提取緩沖液在標(biāo)簽上標(biāo)明的有效期內(nèi)在2-8°C下是穩(wěn)定的。1倍工作提取緩沖液（1:2.5稀釋）可以在2-8°C下儲存在封閉的燒瓶中，有效期為4個(gè)月。

結(jié)合物濃縮液（101倍）必須在1倍工作洗滌液中1:101稀釋（100 ?L 結(jié)合物濃縮液 + 10 mL 1倍工作洗滌液）。如果運(yùn)行半板，準(zhǔn)備8 mL的結(jié)合物（80 ?L + 8 mL 1倍工作洗滌液）。結(jié)合物在標(biāo)簽上標(biāo)明的有效期內(nèi)在2-8°C下是穩(wěn)定的。制備好的結(jié)合物（1:101稀釋的結(jié)合物）不穩(wěn)定，無法儲存。

所有其他測試試劑都可以直接使用。當(dāng)儲存在2-8°C時(shí)，測試試劑在標(biāo)簽上標(biāo)明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。