在人類中，兒茶酚胺類物質如腎上腺素（epinephrine）、去甲腎上腺素（norepinephrine）和多巴胺是交感神經系統(tǒng)的神經遞質，參與許多生理過程。交感神經系統(tǒng)使身體處于高度警戒狀態(tài)，也被稱為身體的戰(zhàn)斗或逃跑反應。此外，兒茶酚胺及其代謝產物表明了身體對急性和慢性壓力的適應。

Bi-CAT(腎上腺素和去甲腎上腺素)ELISA內容：

1.密封箔-即用型

內容：密封箔，包裝在可重新密封的袋中

體積：2x4箔

2.洗滌緩沖液濃縮液-濃縮50倍

內容：含有非離子洗滌劑和生理pH值的緩沖液

體積：2x20mL/瓶，紫色瓶蓋

3.酶結合物-即用型

內容：山羊抗兔免疫球蛋白，與過氧化物酶結合

體積：2x12mL/瓶，紅色瓶蓋

4.底物-即用型

內容：含有3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺的顯色底物，底物緩沖液和過氧化氫

體積：2x12mL/瓶，黑色瓶蓋

5.終止液-即用型

內容：0.25M硫酸

體積：2x12mL/瓶，灰色瓶蓋

6.腎上腺素微孔板條-即用型

內容：1x96孔（12x8）預涂抗原微孔板，包裝在可重新密封的藍色袋中，含干燥劑

7.去甲腎上腺素微孔板條-即用型

內容：1x96孔（12x8）預涂抗原微孔板，包裝在可重新密封的黃色袋中，含干燥劑

8.腎上腺素抗血清-即用型

內容：含有蛋白質（牛）和非汞防腐劑的兔抗腎上腺素抗體，藍色

體積：1x6mL/瓶，藍色瓶蓋

9.去甲腎上腺素抗血清-即用型

內容：含有蛋白質（牛）和非汞防腐劑的兔抗去甲腎上腺素抗體，黃色

體積：1x6mL/瓶，黃色瓶蓋

10.調整緩沖液-即用型

內容：TRIS緩沖液

體積：1x4mL/瓶，綠色瓶蓋

Bi-CAT(腎上腺素和去甲腎上腺素)ELISA預期用途和原理：

Bi-CAT酶免疫測定用于人血漿和尿液中腎上腺素（epinephrine）和去甲腎上腺素（norepinephrine）的定量測定。僅限研究使用，不用于診斷程序。

腎上腺素（epinephrine）和去甲腎上腺素（norepinephrine）通過使用順式二醇特異性親和凝膠進行提取，然后進行酰化，并隨后進行酶促轉化。競爭ELISA試劑盒使用微孔板格式。抗原綁定到微孔板的固相上。酰化的標準品、對照品和樣品與固相結合的分析物競爭有限的抗體結合位點。系統(tǒng)達到平衡后，通過洗滌去除游離抗原和游離抗原-抗體復合物。使用TMB作為底物，通過抗兔IgG-過氧化物酶結合物檢測固相上結合的抗體，產生顏色反應。在450nm處監(jiān)測反應。通過將未知樣品的吸光度與已知標準濃度的標準曲線進行比較，實現(xiàn)未知樣品的定量。建議手動處理ELISA。自動化實驗室設備的驗證是用戶的責任。

樣品收集和儲存：

血漿

應該將全血收集到含有EDTA作為抗凝劑的離心管中，并在收集后立即按照制造商的說明進行離心。

如果出現(xiàn)溶血、黃疸或脂血的樣品，參見2.2.1節(jié)。

儲存：在2-8°C下最長儲存6小時，較長時間（最長6個月）在-20°C下儲存。

應避免反復凍融。

尿液

可以使用自發(fā)尿液或24小時尿液，收集在含有10-15毫升6M鹽酸的瓶中。

如果使用24小時尿液，請記錄收集的尿液總量。

儲存：在2-8°C下最長儲存48小時，在室溫下最長儲存24小時，較長時間（最長6個月）在-20°C下儲存。

應避免反復凍融。

避免直接暴露在陽光下。

測試程序：

使用前讓所有試劑和樣品達到室溫，并輕輕倒置充分混合。

標記提取板和微孔板（從框架中取出使用的微孔條應相應標記，以避免混淆）。

建議進行雙重測定。

建議在微孔板使用前對微孔條進行編號，以避免混淆。

抗血清的結合、酶結合物的結合以及酶的活性都與溫度有關。

溫度越高，吸光度值越高。

不同的孵育時間對吸光度也有類似的影響。

酶免疫測定過程中的最佳溫度在20-25°C之間。

注意：使用振幅約為3毫米、大約600轉/分鐘的微孔板振蕩器是強制性的。

不同設置的振蕩可能會影響結果。

注意：如果出現(xiàn)溢出，在使用設置為405納米的微孔板讀取器讀取孔中溶液的吸光度，需在10分鐘內完成。

典型標準曲線示例，請勿用于計算！

Bi-CAT(腎上腺素和去甲腎上腺素)ELISA文獻參考：

(1) Kim et al. Vitamin C prevents stress-induced damage on the heart caused by the death of

cardiomyocytes, through the down-regulation of the excessive production of

catecholamine, TNF-α, and ROS production in GULO(-I-) Vit C-Insufficient mice. Free

Radical Biology and Medicine, 65:573-583 (2013)

(2) Bada et al. Peripheral vasodilatation determines cardiac output in exercising humans: insight

from atrial pacing. The Journal of Physiology, 590(8):2051-2060 (2012)

(3) Parks et al. Employment and work schedule are related to telomere length in women.

Occupational & Environmental Medicine 68(8):582-589 (2011)