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發(fā)布時間:2024/9/26 8:56:05 閱讀次數(shù):101
急性期蛋白是感染、炎癥或創(chuàng)傷后血漿中濃度增加的蛋白。第一個被認識的急性期蛋白是在1930年由Tillet和Frances在人類中發(fā)現(xiàn)的。α1-酸性糖蛋白(AGP)是人和小鼠體內主要的急性期反應物。在急性炎癥期間,如類風濕性關節(jié)炎、細菌感染等,其在血漿中的濃度會升高,并且可用于檢測炎癥狀況。
α1-酸性糖蛋白檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA),用于測量大鼠生物樣本中的α1-酸性糖蛋白。
作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品大鼠α1酸性糖蛋白ELISA。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 詳情 |
大鼠α1酸性糖蛋白ELISA | ALP-41-AGPRT-E01 | 查看 |
大鼠α1酸性糖蛋白ELISA檢測原理:
雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定的原理在圖1中表示。在這種測定中,樣品中的α1-酸性糖蛋白與已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗α1-酸性糖蛋白抗體發(fā)生反應。通過洗滌去除未結合的蛋白質后,加入與辣根過氧化物酶(HRP)結合的抗AGP抗體。這些酶標記的抗體與之前結合的AGP形成復合物。經(jīng)過另一次洗滌步驟后,通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)來測定免疫吸附劑上結合的酶。結合的酶量與測試樣品中AGP的濃度直接相關;因此,450納米處的吸光度是測試樣品中AGP濃度的量度。測試樣品中AGP的量可以從標準品構建的標準曲線中插值得到,并根據(jù)樣品稀釋進行校正。
試劑(足夠96次測定的數(shù)量)
1. 稀釋液濃縮液(測定緩沖液)
一瓶含有50毫升5倍濃縮的稀釋測定緩沖液。
2. 洗滌液濃縮液
一瓶含有50毫升20倍濃縮的洗滌液。
3. 酶-抗體結合物100倍
一瓶含有150微升親和純化的抗大鼠α1-酸性糖蛋白抗體,與辣根過氧化物酶結合,并在穩(wěn)定緩沖液中。
4. 顯色底物溶液
一瓶含有12毫升3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和過氧化氫,在檸檬酸緩沖液中,pH值為3.3。
5. 終止液
一瓶含有12毫升0.3M硫酸。
警告:避免與皮膚接觸。
6. 抗大鼠α1-酸性糖蛋白ELISA微孔板
十二個可移動的八(8)孔微孔條,在孔架中。每個孔都涂有親和純化的抗大鼠AGP。
7. 大鼠α1-酸性糖蛋白校準品
一瓶含有凍干的大鼠α1-酸性糖蛋白校準品。
僅限研究使用
試劑準備
1. 稀釋液濃縮液
提供的稀釋液是5倍濃縮液,必須用蒸餾水或去離子水(1份緩沖液濃縮液,4份dH2O)稀釋1:5。
2. 洗滌液濃縮液
提供的洗滌液是20倍濃縮液,必須用蒸餾水或去離子水(1份緩沖液濃縮液,19份dH2O)稀釋1:20。當儲存溫度較低時,濃縮液中出現(xiàn)晶體并不罕見。在稀釋前將濃縮液加熱至30-35°C可以溶解晶體。
3. 酶-抗體結合物
通過向每個微孔板測試條添加10微升酶-抗體結合物至990微升1倍稀釋液中,計算每個微孔板測試條所需的工作結合物溶液量。均勻但輕柔地混合。避免起泡。
4. 顯色底物溶液
按供應狀態(tài)直接使用。
5. 終止液
按供應狀態(tài)直接使用。
6. 抗大鼠α1-酸性糖蛋白ELISA微孔板
按供應狀態(tài)直接使用。揭開微孔板袋封口,從袋中取出板。取出在測定中不會使用的所有條和孔,放回袋中并重新密封,并與干燥劑一起存放。
7. 大鼠α1-酸性糖蛋白校準品
向大鼠α1-酸性糖蛋白校準品中加入1.0毫升蒸餾或去離子水,輕輕混合直至溶解。校準品現(xiàn)在的濃度為2.38微克/毫升(如果打算將來使用,應分裝并冷凍重懸的校準品)。大鼠α1-酸性糖蛋白標準品需要在立即使用前準備(見下表)。每步之間充分混合。避免起泡。
程序的局限性
1. 當完全理解了說明書中的信息,并遵循良好的實驗室操作規(guī)范時,將獲得可靠和可重復的結果。
2. 可能影響測定性能的因素包括儀器的正確功能、玻璃器皿的清潔度、蒸餾水或去離子水的質量以及試劑和樣品移液的準確性、洗滌技術、孵育時間或溫度。
3. 不要將試劑與其他批次或來源的試劑混合或替換。
附錄A - 參考血清信息
本試劑盒中包含一瓶參考血清。
請參閱隨附的產(chǎn)品概況表以獲取特定批次的信息。
請注意以下事項:
1參考血清在有效期前是穩(wěn)定的。
2參考血清應適當稀釋,以適應標準曲線范圍。有關說明,請參考協(xié)議中的“樣品稀釋”部分。
3在移液樣品(程序部分)的同時,也應以雙份移液參考血清。
ALPCO產(chǎn)品種類多樣,可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等,涉及神經(jīng)生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域,尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。
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