細胞來源
JCRB
細胞檢測
細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
傳代方法
建議1:2-1:3 兩天換液一次
備注
該細胞已通過STR。
建議同時購買完培,同時購買非常優惠
細胞收到后處理:
收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快和我們聯系。如包裝完好,取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,在顯微鏡下觀察細胞形態是否正常,細胞的貼壁情況以及細胞密度,然后放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置2-3小時,以穩定細胞狀態。
細胞培養步驟:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL完全培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,完全脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。