細胞名稱
HUT-102人T淋巴瘤細胞
細胞形態(tài)
圓形；淋巴母細胞樣
生長特性
懸浮生長
傳代方法
1:2傳代
傳代情況
2~3天換液
培 養(yǎng) 基
1640+ 10% FBS+1%P/S
培養(yǎng)體系
溫度：37℃ ； 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞描述
HUT 102是一株T細胞淋巴瘤細胞系。該細胞具有成熟T細胞系的特征，細胞表面呈現(xiàn)IL-2活性，E花環(huán)陽性，表面免疫球蛋白、EBV核抗原和TdT（Terminaldeoxyribonucleotidyl-transferase）反應陰性。該細胞系還可釋放與T細胞淋巴瘤相關的單一C型逆轉病毒（retrovirus），即HTLVI病毒。
凍存條件
基礎培養(yǎng)基50%+40%FBS+10%DMSO，液氮
細胞收到后處理：
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)淖詈棉k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松）
細胞培養(yǎng)步驟：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
懸浮瓶裝細胞，先將培養(yǎng)瓶外表面用酒精擦拭干凈，鏡檢細胞狀態(tài)。若狀態(tài)良好，請將細胞整瓶放于培養(yǎng)箱穩(wěn)定1-2小時后拿出，瓶蓋開啟前請將培養(yǎng)瓶瓶口再次消毒、過火，將整瓶細胞懸液分別離心（1000rmp 5min）后收集于離心管中，視其離心后的細胞量進行放回培養(yǎng)或分離培養(yǎng)。
半懸浮瓶裝細胞，先將培養(yǎng)瓶外表面用酒精擦拭干凈，鏡檢細胞狀態(tài)。若狀態(tài)良好，請將細胞整瓶放于培養(yǎng)箱穩(wěn)定1-2小時后拿出，瓶蓋開啟前請將培養(yǎng)瓶瓶口再次消毒、過火，將整瓶細胞懸液中的上層懸浮細胞離心（1000rmp 5min）后收集于離心管中，重懸細胞后放回原瓶與貼壁細胞共同培養(yǎng)至傳代。重懸上層懸浮細胞時必須保持下層貼壁細胞的營養(yǎng)條件，防止貼壁細胞缺乏營養(yǎng)。
