細胞名稱
COLO320DM人結直腸腺癌細胞
細胞形態
圓形有折光
生長特性
半貼壁半懸浮
傳代方法
1:2傳代
傳代情況
2~3天換液
培 養 基
1640+10%FBS
培養體系
溫度:37℃ ; 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞描述
通過STR檢測
該細胞可產生5-羥色胺、去甲腎上腺素、腎上腺素、ACTH和甲狀旁腺素。角蛋白、波形蛋白弱陽性
凍存條件
無血清細胞凍存液
細胞收到后處理:
細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿完全培養液并封好瓶口是細胞運輸的最好辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作,培養箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的完全培養液收集至離心管中,加入6ml完全培養基,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。(注意發貨的是密封培養瓶的話,放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰松)
細胞培養步驟:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL完全培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
懸浮瓶裝細胞,先將培養瓶外表面用酒精擦拭干凈,鏡檢細胞狀態。若狀態良好,請將細胞整瓶放于培養箱穩定1-2小時后拿出,瓶蓋開啟前請將培養瓶瓶口再次消毒、過火,將整瓶細胞懸液分別離心(1000rmp 5min)后收集于離心管中,視其離心后的細胞量進行放回培養或分離培養。
半懸浮瓶裝細胞,先將培養瓶外表面用酒精擦拭干凈,鏡檢細胞狀態。若狀態良好,請將細胞整瓶放于培養箱穩定1-2小時后拿出,瓶蓋開啟前請將培養瓶瓶口再次消毒、過火,將整瓶細胞懸液中的上層懸浮細胞離心(1000rmp 5min)后收集于離心管中,重懸細胞后放回原瓶與貼壁細胞共同培養至傳代。重懸上層懸浮細胞時必須保持下層貼壁細胞的營養條件,防止貼壁細胞缺乏營養。