本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,提供純化所需要的所有溶液和介質(zhì),不需要單獨準備每種試劑, 免去用戶自己摸索條件。
2. 適用于 PCR 標記、隨機引物標記、切口平移和填入法標記。
3. 能去掉絕大部分的未標記物、鹽離子等小分子。
4. 足夠 10 次純化使用,每次可以純化 50 uL 的標記反應(yīng)液。
5. 可用于 DIG、生物素、Cy3、Cy5 等非同位素標記的 DNA 和 RNA 探針
(由于標記分子帶非極性基團,容易進入有機相,因此這些探針不能用傳 統(tǒng)的酚氯仿抽提-乙醇沉淀法純化)。
成份 | 編號 | 10 次小紙盒包裝 |
Sephadex G50 介質(zhì) | 121115A | 15 mL |
0.7 mL 離心柱及管套 | 121115B | 10 套 |
TE 溶液 | 80934 | 10 mL |
使用手冊 | 1 份 |
注意:由于非同位素標記的探針濃度一般都比較低,非常容易吸附到槍頭或離心管的表面,造成探針的損失,因此最好使用硅化的離心管和槍頭。
1. 搖晃 Sephadex G50 介質(zhì)至均勻,迅速轉(zhuǎn)移 0.5 mL 到離心柱中,套上套管(又叫收集管)。
2. 2000rpm 室溫離心 1 分鐘,Sephadex G50 介質(zhì)將壓緊在柱子里面。
3. 倒掉套管中的穿透液,再加 0.5mL 的搖晃后得到的 Sephadex G50 介質(zhì),2000rpm 室溫離心 1 分鐘。
4. 經(jīng)上述步驟會得到體積約為 0.5mL 壓緊后的 Sephadex G50 介質(zhì)。如不足,再加入少量的 G50 介質(zhì)離心,直到體積達到 0.5 mL 左右。倒掉套管中的穿透液。
5. 在柱子中 Sephadex G50 界面的上面加入 50 uL TE 緩沖液,套上套管, 2000rpm 室溫離心 1 分鐘,測量收集管中穿透液的體積。
6. 重復(fù)上步 3-5 次,直到收集管中穿透液的體積跟加入的體積一樣(50 uL)。
7. 將 50 uL 的標記探針(必須使用 50 uL 樣品。如果沒有 50 uL,需要用TE 緩沖液或水補足到 50 uL)加到柱子中 Sephadex G50 界面的上面, 套上一個自備的(最好是硅化的)離心管。
8. 2000rpm 室溫離心 1 分鐘,離心管中的穿透液將含標記探針,未參入的標記物將滯留在介質(zhì)中。
電泳或點雜交檢測探針回收效率后直接使用或放-20℃長期保存