Tubulin-Tracker Red是一種Tubulin紅色熒光探針,可以用于培養細胞或組織切片的Tubulin特異性熒光染色。
Tubulin-Tracker Red探針為熒光染料Alexa Fluor 555標記的抗α-Tubulin小鼠單克隆抗體(克隆號為DM1A),可以識別α-Tubulin的425-450aa。可以用于人、小鼠、大鼠、牛、豬、豚鼠和禽類(avian)樣品α-Tubulin的檢測。最大激發波長為555nm,最大發射波長為565nm。Alexa Fluor 555的熒光光譜和Cy3非常接近,可以用Cy3的檢測條件進行檢測。
本產品可以用于細胞或組織內的微管(microtubule)的熒光檢測。可以用于熒光顯微鏡觀察,也可用于流式細胞儀檢測。使用本產品染色細胞內微管的效果參考圖1。
圖1. Tubulin-Tracker Red對NRK-52E細胞(大鼠腎小管上皮細胞)的染色效果。DAPI 染色的NRK-52E細胞其細胞核呈現藍色熒光; Tubulin-Tracker Red染色的NRK-52E細胞,微管呈現紅色熒光。
本產品使用時的推薦稀釋比例為1:50-100,共可以配制2-4ml染色液。如果每個片子需要使用100µl染色工作液,每個包裝的本產品足夠用于20-40個片子的染色。
包裝清單:
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
C1050 | Tubulin-Tracker Red(抗體法微管紅色熒光探針) | 40µl |
- | 說明書 | 1份 |
保存條件:
-20℃避光保存,1年有效。
注意事項:
對于微量的液體,每次使用前先離心數秒鐘,使液體充分沉降到管底。
熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
需自備蓋玻片和載玻片(可以向雅吉訂購)。
本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1.固定細胞或組織切片的熒光染色:
a.用PBS洗滌細胞或組織切片2次。
b.用雅吉的免疫染色固定液(P0098)或PBS配制的3.7%甲醛溶液室溫固定細胞或組織切片約10-20分鐘。
c.用雅吉的免疫染色洗滌液(P0106)或含0.1% Triton X-100的PBS洗滌2-3次,每次5分鐘。
d.用雅吉的免疫熒光染色二抗稀釋液(P0108)或含有1-5%BSA和0.1% Triton X-100的PBS按照1:50-100的比例稀釋Tubulin-Tracker Red,例如4µl Tubulin-Tracker Red用0.2ml或0.4ml稀釋液稀釋,稀釋后的溶液即為Tubulin-Tracker Red染色工作液。稀釋比例可以根據實際染色效果進行適當調整。
e.把Tubulin-tracker Red染色工作液按照約每個片子100µl的比例滴加到片子上,室溫避光孵育30-60分鐘。為防止蒸發,孵育時最好將片子置于載玻片染色盒中,載玻片染色盒(FSR958)可以向雅吉訂購。
f.用雅吉的免疫染色洗滌液(P0106) 或含0.1% Triton X-100的PBS洗滌2-4次,每次5分鐘。
g.隨后可以直接用熒光顯微鏡進行觀察。也可以用抗熒光淬滅封片液封片后保存和觀察。
2.流式細胞儀檢測:
a.每個樣品收集約20-50萬細胞。
b.PBS洗滌一次。
c.用雅吉的免疫染色固定液(P0098)或PBS配制的3.7%甲醛溶液室溫固定細胞約10-20分鐘。
d.用雅吉的免疫染色洗滌液(P0106)或含0.1% Triton X-100的PBS洗滌2-3次,每次5分鐘。
e.用雅吉的免疫熒光染色二抗稀釋液(P0108)或含有1-5%BSA和0.1% Triton X-100的PBS重懸細胞,然后按照1:50-100的比例加入Tubulin-Tracker Red。例如1µl Tubulin-Tracker Red加入到50-100µl細胞懸液中。Tubulin-Tracker Red稀釋比例可以根據實際染色效果進行適當調整。
f.室溫避光孵育1小時。
g.用雅吉的免疫染色洗滌液(P0106)或含0.1% Triton X-100的PBS洗滌2-3次,每次5分鐘。隨后即可進行流式細胞儀分析。