臺(tái)盼藍(lán)染色細(xì)胞存活率檢測(cè)試劑盒(Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit),是利用正常的健康細(xì)胞能夠排斥臺(tái)盼藍(lán),而喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞可以被臺(tái)盼藍(lán)染色研制而成。嚴(yán)格來說,臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)的是細(xì)胞膜的完整性,通常認(rèn)為細(xì)胞膜喪失完整性,即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。
臺(tái)盼藍(lán)染色后,通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù),就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。臺(tái)盼藍(lán)染色后的HeLa細(xì)胞請(qǐng)參考圖1。
圖1. 細(xì)胞臺(tái)盼藍(lán)染色效果圖。胰酶消化下來的HeLa細(xì)胞,1000g離心1分鐘,棄上清,用適量細(xì)胞重懸液重懸后,用等體積臺(tái)盼藍(lán)染色液(2X)染色。箭頭所示為臺(tái)盼藍(lán)染色的死亡細(xì)胞。注:本HeLa細(xì)胞經(jīng)過一定的細(xì)胞壞死誘導(dǎo)處理。
臺(tái)盼藍(lán)染色只需3-5分鐘即可完成,并且操作非常簡(jiǎn)單。
本試劑盒足夠檢測(cè)100個(gè)細(xì)胞樣品。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
C0011-1 | 臺(tái)盼藍(lán)染色液(2X) | 10ml |
C0011-2 | 細(xì)胞重懸液 | 100ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
4℃保存,一年有效。
注意事項(xiàng):
本試劑盒提供的兩種溶液都是無菌的,使用時(shí)最好在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行,避免細(xì)菌污染。
本產(chǎn)品長(zhǎng)時(shí)間存放可能會(huì)出現(xiàn)少量顆粒狀沉淀,可在37℃水浴約10分鐘以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。 臺(tái)盼藍(lán)對(duì)人體有毒,操作時(shí)請(qǐng)?zhí)貏e小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. 收集細(xì)胞:
對(duì)于貼壁細(xì)胞先用胰酶和/或EDTA消化下細(xì)胞。對(duì)于懸浮細(xì)胞,則可以直接收集細(xì)胞。把收集的細(xì)胞在1000-2000g離心1分鐘,棄上清,用1毫升或根據(jù)細(xì)胞的量用適當(dāng)細(xì)胞重懸液重新懸起細(xì)胞。
2. 臺(tái)盼藍(lán)染色:
吸取100微升重懸的細(xì)胞到一塑料離心管內(nèi),加入100微升臺(tái)盼藍(lán)染色液(2X),輕輕混勻,染色3分鐘 (染色3分鐘時(shí)間已經(jīng)足夠,但染色時(shí)間可以更長(zhǎng)一些,但不宜超過10分鐘)。
注:對(duì)于重懸于細(xì)胞培養(yǎng)液中的細(xì)胞,也可以直接加入等體積的臺(tái)盼藍(lán)染色液(2X)進(jìn)行染色。
3. 計(jì)數(shù):
吸取少量經(jīng)過染色的細(xì)胞,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。通常如果要比較精確地進(jìn)行定量,每個(gè)細(xì)胞樣品至少數(shù)500個(gè)細(xì)胞,數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。
細(xì)胞存活率=(細(xì)胞總數(shù)-藍(lán)色細(xì)胞數(shù))/細(xì)胞總數(shù)×100%