細胞凋亡－Hoechst染色試劑盒(Hoechst Staining Kit)為您提供了一種經典而又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。細胞發生凋亡時，染色質會固縮。所以Hoechst 33258染色后，在熒光顯微鏡下觀察，正常細胞的細胞核呈正常的藍色，而凋亡細胞的細胞核會呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染，顏色有些發白。典型的Hoechst 33258染色后的細胞圖片參考下圖。
 |  |
| 正常細胞核 | 刺激后有致密濃染的凋亡細胞 |
只需25分鐘即可完成細胞凋亡檢測的整個過程。
本試劑盒提供了固定液，染色液，及抗熒光淬滅封片液。
本試劑盒對貼壁細胞，懸浮細胞和組織切片均適用。
足夠檢測100個樣品。
包裝清單：
| 產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
| C0003-1 | 固定液 | 50ml |
| C0003-2 | Hoechst 33258染色液 | 50ml |
| C0003-3 | 抗熒光淬滅封片液 | 5ml |
| — | 說明書 | 1份 |
保存條件：
4℃保存，Hoechst 33258染色液需4℃避光保存，半年有效。
注意事項：
需可以觀察藍色熒光的熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡。
需PBS或0.9%NaCl溶液。
需自備蓋玻片與載玻片。蓋玻片與載玻片聯系客服訂購
熒光物質均易發生淬滅，染色后的樣品宜避光保存。可以向選購各種型號的載玻片存儲盒。
在使用抗淬滅封片液的情況下可以減緩淬滅，但仍宜盡量避光。
本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1．貼壁細胞
a.取潔凈蓋玻片在70%乙醇中浸泡5分鐘或更長時間，無菌超凈臺內吹干或用無菌的PBS或0.9%NaCl等溶液洗滌三遍，再用細胞培養液洗滌一遍。將蓋玻片置于六孔板內，種入細胞培養過夜，使約為50%-80%滿。
b.刺激細胞發生凋亡后，吸盡培養液，加入0.5ml 固定液，固定10分鐘或更長時間(可4℃過夜)。
c.去固定液，用PBS或0.9%NaCl 洗兩遍，每次3分鐘，吸盡液體。洗滌時宜用搖床，或手動晃動。
d.加入0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分鐘。也宜用搖床，或手動晃動數次。
e.去染色液，用PBS或0.9%NaCl 洗兩遍，每次3分鐘，吸盡液體。洗滌時宜用搖床，或手動晃動。
f.滴一滴抗熒光淬滅封片液于載玻片上，蓋上貼有細胞的蓋玻片，讓細胞接觸封片液，盡量避免氣泡。
g.熒光顯微鏡可檢測到呈藍色的細胞核。激發波長350nm左右，發射波長460nm左右，圖譜請參考下圖。
2.懸浮細胞
a.離心收集細胞樣品于1.5ml離心管內，加入0.5ml 固定液，緩緩懸起細胞，固定10分鐘或更長時間(可4℃過夜)。
b.離心去固定液，用PBS或0.9%NaCl 洗兩遍，每次3分鐘。洗滌期間手動晃動數次。
c.離心后吸去大部分液體保留約50μl液體，再緩緩懸起細胞，滴加至載玻片上，盡量使細胞分布均勻。
d.稍晾干，使細胞貼在載玻片上不易隨液體流動。
e.均勻滴上0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分鐘。用吸水紙從邊緣吸去液體，微晾干。
f.去染色液，用PBS或0.9%NaCl 洗兩遍，每次3分鐘，吸盡液體。洗滌時宜用搖床，或手動晃動。
g.滴一滴抗熒光淬滅封片液于載玻片上，蓋上一潔凈的蓋玻片，盡量避免氣泡。
h.熒光顯微鏡可檢測到呈藍色的細胞核。激發波長350nm左右，發射波長460nm左右，圖譜請參考下圖。
3.組織切片
a.常規包埋切片后，根據切片的不同類型，處理至可以用于免疫組化染色。
b.PBS或0.9%NaCl 洗兩遍，每次3分鐘，吸盡液體。洗滌時宜用搖床，或手動晃動。可在六孔板中操作。
c.加入0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分鐘。也宜用搖床，或手動晃動數次。
d.去染色液，用PBS或0.9%NaCl 洗兩遍，每次3分鐘，吸盡液體。洗滌時宜用搖床，或手動晃動。
e.小心將切片置于載玻片上，滴一滴抗淬滅封片液，蓋上一潔凈的蓋玻片，盡量避免氣泡。
f.熒光顯微鏡可檢測到呈藍色的細胞核。激發波長350nm左右，發射波長460nm左右，圖譜請參考下圖。
Hoechst 33258的吸收光譜和發射光譜，左側峰為吸收光譜，右側峰為發射光譜。
