WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IC, Immunocytochemistry.
H, human; M, mouse; R, rat; Mk, monkey; B, bovine; Ca, canine; Po, porcine.
本IRS1抗體(IRS1 antibody,即Insulin receptor substrate 1 antibody或IRS-1 antibody)為進口分裝,用重組小鼠IRS1一段多肽(aa431-446)作為抗原制備而成的抗IRS1小鼠單克隆抗體。克隆號為4.2.2。
本IRS1抗體識別的是總IRS1(total IRS1),可以檢測內源性的IRS1,未發現和其它亞型如IRS2等有交叉反應。
IRS1(insulin receptor substrate 1),也稱IRS-1,是胰島素受體(insulin receptor)激酶的主要底物。IRS1含有多個酪氨酸磷酸化位點,這些位點磷酸化后可以結合含有SH2結構域的蛋白,如PI3-K和GRB2等,從而介導胰島素誘導的代謝和促生長信號。IRS1還含有30多個serine/threonine磷酸化位點。胰島素刺激可以誘導IRS1的Ser302磷酸化。JNK和IKK可以磷酸化IRS-1的Ser307;AMPK家族的SIK-2可以磷酸化IRS1的Ser789。PKC可以調節IRS1的Ser612位點磷酸化,而IRS1的Ser636/639位點磷酸化受mTOR信號通路調控。PKCτ介導IRS1的Ser1101位點磷酸化。IRS1一方面介導了胰島素的信號轉導,但IRS1過表達或一些絲氨酸磷酸化也會導致胰島素抵抗(insulin resistance)。
配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據抗原水平的高低作適當調整):
WB | IP | IC |
1:500 | 1:50 | 1:250 |
本抗體如果用于常規的Western檢測,至少可以檢測20次。
包裝清單:
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
AI618-1 | IRS1抗體(小鼠單抗) | 40μl |
AI618-2 | Western一抗稀釋液 | 20ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
IRS1抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導致出現輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項:
在Western實驗后,請注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體,包括已經使用過的稀釋抗體,4℃保存。
回收后重復使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發現抗體出現輕微混濁現象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續檢測。如果回收的抗體出現明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. Western檢測:
A. 按照1:500用Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時,確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續使用。
D. 按照Western的實驗步驟進行后續的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。具體操作可以參考如下網頁:
2. 免疫染色:
可以使用免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,具體操作可以聯系客服
3. 其它實驗操作請自行參考適當的protocol進行。