WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence; F, Flow cytometry.
H, human; M, mouse; R, rat.
本Cytochrome C抗體(Cytochrome C antibody，細(xì)胞色素C抗體)為進(jìn)口分裝，用變性的重組人Cytochrome C作為抗原制備而成的抗Cytochrome C小鼠單克隆抗體。克隆號(hào)為7H8。
本Cytochrome C抗體識(shí)別的是總Cytochrome C (total Cytochrome C)，可以檢測(cè)內(nèi)源性的Cytochrome C，未發(fā)現(xiàn)和其它激酶有交叉反應(yīng)。
本抗體可以用于通過(guò)Western或免疫熒光檢測(cè)線粒體內(nèi)的Cytochrome C的釋放情況，以確定Cytochrome C釋放和凋亡的相關(guān)性，或直接用Cytochrome C釋放來(lái)判斷細(xì)胞凋亡的狀況。正常細(xì)胞Cytochrome C的染色集中在線粒體，而凋亡細(xì)胞的Cytochrome C則呈彌散分布。
Cytochrome C，即細(xì)胞色素C，是線粒體電子呼吸鏈中的一個(gè)重要蛋白。Cytochrome C在進(jìn)化上高度保守。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，細(xì)胞色素C會(huì)從線粒體中釋放到細(xì)胞漿中，并且作為細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵調(diào)控步驟。在細(xì)胞色素C和dATP存在的情況下，Caspase-9和Apaf-1可以相互結(jié)合，并促使Caspase-9激活。細(xì)胞色素C的釋放和Caspase-9的激活對(duì)于激活其它的Caspase包括Caspase-3，以及導(dǎo)致后續(xù)的DNA片段化(DNA fragmentation)至關(guān)重要。細(xì)胞凋亡的抑制蛋白，Bcl-2或Bcl-XL都可以抑制細(xì)胞色素C從線粒體的釋放；而細(xì)胞凋亡的促進(jìn)蛋白Bax，可以誘導(dǎo)細(xì)胞色素C從線粒體的釋放。
Cytochrome C從線粒體釋放到細(xì)胞漿中常被作為細(xì)胞凋亡的一個(gè)重要指標(biāo)。
配套提供了Western一抗稀釋液，可以用于Western檢測(cè)時(shí)的一抗稀釋。
建議抗體使用時(shí)的稀釋比例如下(實(shí)際使用時(shí)需根據(jù)抗原水平的高低作適當(dāng)調(diào)整)：
| WB | IP | IF | F |
| 1:200 | 1:20 | 1:50 | 1:50 |
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測(cè)，至少可以檢測(cè)20次。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| AC909-1 | Cytochrome C抗體(小鼠單抗) | 100μl |
| AC909-2 | Western一抗稀釋液 | 20ml |
| — | 說(shuō)明書 | 1份 |
保存條件：
Cytochrome C抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長(zhǎng)期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項(xiàng)：
在Western實(shí)驗(yàn)后，請(qǐng)注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進(jìn)行Western實(shí)驗(yàn)時(shí)至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體，包括已經(jīng)使用過(guò)的稀釋抗體，4℃保存。
回收后重復(fù)使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續(xù)檢測(cè)。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長(zhǎng)霉長(zhǎng)菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說(shuō)明：
1. Western檢測(cè)：
A. 按照1:200用碧云天提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經(jīng)過(guò)封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動(dòng)過(guò)夜或室溫緩慢搖動(dòng)2小時(shí)，確保稀釋的抗體至少能在搖動(dòng)的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗，4℃保存以備下次繼續(xù)使用。
D. 按照Western的實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行后續(xù)的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測(cè)等操作。
2. 免疫染色：
可以使用碧云天生產(chǎn)的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體，使用后注意回收稀釋好的一抗，
3. 其它實(shí)驗(yàn)操作請(qǐng)自行參考適當(dāng)?shù)膒rotocol進(jìn)行。
