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His-tag抗體(小鼠單抗)

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 WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence.

      本His-tag抗體(His antibody)為進口分裝,用經過適當修飾的人工合成6xHis作為抗原制備而成的抗His-tag小鼠單克隆抗體。克隆號為AD1.1.10。
      本His-tag抗體廣泛地用于His-tag(HHHHHH)融合表達蛋白的檢測。本抗體可以檢測位于融合蛋白N-terminal的His-tag,也可以檢測位于融合蛋白C-terminal的His-tag。
      His-tag常用于和目的蛋白融合表達后通過鎳柱(Ni++ affinity resins)進行親和純化。
      DNA重組技術使給目標蛋白帶上特定tag成為可能,這些常用的tag包括myc、HA、Flag、His、GST等。帶上tag后,通常不會影響目標蛋白的生物活性和細胞內定位。但檢測和tag融合表達的目標蛋白時,使用商業化的相應tag抗體就可以完成,大大方便了很多實驗檢測。
      His-tag抗體可用于檢測和His-tag融合表達蛋白的表達、細胞內定位,以及純化、定性或定量檢測His-tag融合表達蛋白等。
      配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
      建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據抗原水平的高低作適當調整):

WB IP IF
1:1000 1:50-100 1:200

      本抗體如果用于常規的Western檢測,至少可以檢測20次。
包裝清單:

產品編號 產品名稱 包裝
AH367-1 His-tag抗體(小鼠單抗) 20μl
AH367-2 Western一抗稀釋液 20ml
說明書 1份

保存條件:
      His-tag抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導致出現輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項:
      對于本抗體,Western檢測時一抗要4℃緩慢搖動過夜,如果僅短時間與一抗孵育檢測效果較差。
      在Western實驗后,請注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體,包括已經使用過的稀釋抗體,4℃保存。
      回收后重復使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發現抗體出現輕微混濁現象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續檢測。如果回收的抗體出現明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
      本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
      為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明:
1. Western檢測:
a. 按照1:1000用Western一抗稀釋液稀釋抗體。
b. 把經過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜,確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
c. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續使用。
d. 按照Western的實驗步驟進行后續的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。
2. 免疫染色:
可以使用生產的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,
3. 其它實驗操作請自行參考適當的protocol進行。

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