來源 | 用途 | 交叉反應(yīng)性 | 抗體類型 | HDAC4分子量 |
Mouse | WB, IP, IC, E | H, M, R | IgG2a | ~140kD |
WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IC, Immunocytochemistry; E, ELISA.
H, human; M, mouse; R, rat.
本HDAC4抗體(HDAC4 antibody,即Histone Deacetylase 4 antibody)為進口分裝,用經(jīng)過適當修飾的人工合成的人
HDAC4氨基端一段多肽(aa 1-19)作為抗原制備而成的抗HDAC4小鼠單克隆抗體。克隆號為HDAC4-144。
本HDAC4抗體識別的是總HDAC4(total HDAC4),可以檢測內(nèi)源性的HDAC4,未發(fā)現(xiàn)和其它HDAC蛋白有交叉反應(yīng)。
染色質(zhì)由重復的核小體(necliosome)構(gòu)成,而核小體則包含了由Histone H2A,H2B,H3和H4各兩個分子組成的八聚體和與該八聚體結(jié)合的DNA。組蛋白(histone)上的一些Lys位點,可以被乙酰化修飾,從而影響染色質(zhì)的空間結(jié)構(gòu),最終影響該區(qū)域的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控。通常當組蛋白被乙酰化時,染色質(zhì)處于相對松散的構(gòu)象,此時轉(zhuǎn)錄因子可以結(jié)合到該區(qū)域促進相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。反之,當組蛋白被去乙酰化時,染色質(zhì)結(jié)構(gòu)會變得相對致密,該區(qū)域相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄就會被抑制。組蛋白可以被多種乙酰化酶乙酰化,包括PCAF,p300/CBP,GCN5,SRC-1,TAFII250,BRCA-2和Patt1等。組蛋白去乙酰化酶包括HDAC(histone deacetylase)家族和Sirtuin家族(Sirt家族)。HDAC家族包括HDAC1,HDAC2,HDAC3,HDAC4,HDAC5,HDAC6,HDAC7,HDAC8,HDAC9,HDAC10和HDAC11。通常HDAC可以去乙酰化染色質(zhì)中某些特定區(qū)域的組蛋白,導致該區(qū)域的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)變得相對緊密,從而抑制該區(qū)域相關(guān)基因的表達。Class I HDAC包括HDAC1,2,3,8;Class II HDAC包括HDAC4,5,6,7,9,10。Sirtuin家族被稱為Class III HDAC。Class IV HDAC只包括HDAC11。HDAC1,2,8主要定位在細胞核;而HDAC3則在細胞核和細胞漿都有分布,并且分布在膜結(jié)構(gòu)上。Class II HDAC在特定條件下可以在細胞核和細胞漿之間穿梭(shuttle in and out)。HDAC在命名時被稱為組蛋白去乙酰化酶,但事實上它們可以去乙酰化多種多樣的蛋白。例如,HDAC6可以和微管(microtuble)結(jié)合,可以去乙酰化tubulin,Hsp90和cortactin等。目前發(fā)現(xiàn)大量的蛋白可以被乙酰化修飾,因此HDAC等乙酰化修飾酶被認為在基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導、生長發(fā)育、分化凋亡、代謝性疾病和腫瘤等多種生理病理過程中發(fā)揮重要作用。HDAC的抑制劑目前被認為是很有前景的腫瘤治療藥物。
HDAC4有其自身的核定位信號(nuclear localization signal,NLS)和出核信號(nuclear export signal,NES)。HDAC4可以和14-3-3或MEF2相互作用,從而定位到細胞核中發(fā)揮作用。HDAC4在TGF信號通路中也有一定作用。HDAC4可以調(diào)控骨骼和肌肉的發(fā)育。另外,維持適當?shù)腍DAC4蛋白水平和保持良好的視力有密切關(guān)系。
配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據(jù)抗原水平的高低作適當調(diào)整):
WB | IP | IC | E |
1:1000 | 1:100 | 1:200 | 1:5000 |
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測,至少可以檢測20次。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
AH388-1 | HDAC4抗體(小鼠單抗) | 20μl |
AH388-2 | Western一抗稀釋液 | 20ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
HDAC4抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項:
在Western實驗后,請注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體,包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體,4℃保存。
回收后重復使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. Western檢測:
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經(jīng)過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時,確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續(xù)使用。
D. 按照Western的實驗步驟進行后續(xù)的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。具
2. 免疫染色:
可以使用生產(chǎn)的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,
3. 其它實驗操作請自行參考適當?shù)膒rotocol進行。