來源 | 用途 | 交叉反應性 | 抗體類型 | HDAC3分子量 |
Mouse | WB, IP, IC | H, M, R, Bo, Ham | IgG2a | 49~53kD |
WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IC, immunocytochemistry.
H, human; M, mouse; R, rat; Bo, bovine; Ham, Hamster.
本HDAC3抗體(HDAC3 antibody,即Histone Deacetylase 3 antibody為進口分裝,用經過適當修飾的人工合成的人
HDAC3一段多肽(aa 411-428)作為抗原制備而成的抗HDAC3小鼠單克隆抗體。克隆號為3G6。
染色質由重復的核小體(necliosome)構成,而核小體則包含了由Histone H2A,H2B,H3和H4各兩個分子組成的八聚體和與該八聚體結合的DNA。組蛋白(histone)上的一些Lys位點,可以被乙酰化修飾,從而影響染色質的空間結構,最終影響該區域的基因轉錄調控。通常當組蛋白被乙酰化時,染色質處于相對松散的構象,此時轉錄因子可以結合到該區域促進相關基因的轉錄。反之,當組蛋白被去乙酰化時,染色質結構會變得相對致密,該區域相關基因的轉錄就會被抑制。組蛋白可以被多種乙酰化酶乙酰化,包括PCAF,p300/CBP,GCN5,SRC-1,TAFII250,BRCA-2和Patt1等。組蛋白去乙酰化酶包括HDAC(histone deacetylase)家族和Sirtuin家族(Sirt家族)。HDAC家族包括HDAC1,HDAC2,HDAC3,HDAC4,HDAC5,HDAC6,HDAC7,HDAC8,HDAC9,HDAC10和HDAC11。通常HDAC可以去乙酰化染色質中某些特定區域的組蛋白,導致該區域的染色質結構變得相對緊密,從而抑制該區域相關基因的表達。Class I HDAC包括HDAC1,2,3,8;Class II HDAC包括HDAC4,5,6,7,9,10。Sirtuin家族被稱為Class III HDAC。Class IV HDAC只包括HDAC11。HDAC1,2,8主要定位在細胞核;而HDAC3則在細胞核和細胞漿都有分布,并且分布在膜結構上。Class II HDAC在特定條件下可以在細胞核和細胞漿之間穿梭(shuttle in and out)。HDAC在命名時被稱為組蛋白去乙酰化酶,但事實上它們可以去乙酰化多種多樣的蛋白。例如,HDAC6可以和微管(microtuble)結合,可以去乙酰化tubulin,Hsp90和cortactin等。目前發現大量的蛋白可以被乙酰化修飾,因此HDAC等乙酰化修飾酶被認為在基因轉錄調控、信號轉導、生長發育、分化凋亡、代謝性疾病和腫瘤等多種生理病理過程中發揮重要作用。HDAC的抑制劑目前被認為是很有前景的腫瘤治療藥物。
HDAC3具有組蛋白去乙酰化酶活性。同時HDAC3可通過與鋅指類轉錄因子YY1相結合而參與轉錄調節。HDAC3可下調p53功能,從而調整細胞生長和凋亡過程。HDAC3被認為是一種抑癌基因。
配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據抗原水平的高低作適當調整):
WB | IP | IC |
1:1000 | 1:100 | 1:200 |
本抗體如果用于常規的Western檢測,至少可以檢測20次。
包裝清單:
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
AH385-1 | HDAC3抗體(小鼠單抗) | 20μl |
AH385-2 | Western一抗稀釋液 | 20ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
HDAC3抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導致出現輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項:
在Western實驗后,請注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體,包括已經使用過的稀釋抗體,4℃保存。
回收后重復使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發現抗體出現輕微混濁現象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續檢測。如果回收的抗體出現明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. Western檢測:
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時,確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續使用。
D. 按照Western的實驗步驟進行后續的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。
2. 免疫染色:
可以使用生產的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,
3. 其它實驗操作請自行參考適當的protocol進行。