來源 | 用途 | 交叉反應性 | 抗體類型 | CDK4分子量 |
Mouse | WB, IC, IP | H, M, R, P | IgG1 | ~34kD |
WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence; IC, Immunocytochemistry.
H, Human; M, Mouse; R, Rat; C,Chicken; Co, Cow; D, Dog; P, Pig; Mk, Monkey; Z, Zebrafish.
本CDK4抗體(CDK4 antibody,即Cyclin-dependent kinase4 antibody)為進口分裝,用重組人CDK4作為抗原制備而成的抗CDK4小鼠單克隆抗體。克隆號為DCS-35。
本CDK4抗體特異識別的是總CDK4(total CDK4),不識別Cdk家族其它成員。
CDK4屬于絲氨酸絲氨酸蛋白激酶家族。CDK(Cyclin-dependent kinase)的激酶活性受其T-loop的磷酸化、cyclin、以及Cip/Kip或INK等CDK抑制蛋白的調控。無活性的CDK4/cyclin D和p27/Cip1形成的四聚復合物在有絲分裂信號的刺激下,會導致p27的釋放和降解。處于活化狀態的CDK4/cyclin D可以磷酸化Rb蛋白(retinoblastoma protein),導致轉錄因子E2F的釋放,并激活G1/S期基因的表達。Hela細胞紫外照射后可以上調p16 INK4a和CDK4/cyclin D3的結合,導致G2期的延滯,說明CDK4/cyclin D3的活性對于在細胞周期中通過G2期是很重要的。CDK4以及和其相關的一些蛋白包括cyclin D、Rb、p16INK4a的突變和很多腫瘤的發生有密切的關系。
配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據抗原水平的高低作適當調整):
WB | IC | IP |
1:300 (1:100-500) | 1:150 | 1:150 |
本抗體如果用于常規的Western檢測,至少可以檢測30次。
包裝清單:
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
AC251-1 | CDK4抗體(小鼠單抗) | 100μl |
AC251-2 | Western一抗稀釋液 | 30ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
CDK4抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導致出現輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項:
在Western實驗后,請注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體,包括已經使用過的稀釋抗體,4℃保存。
回收后重復使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發現抗體出現輕微混濁現象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續檢測。如果回收的抗體出現明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. Western檢測:
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時,確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續使用。
D. 按照Western的實驗步驟進行后續的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。
2. 免疫染色:
可以使用生產的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,
3. 其它實驗操作請自行參考適當的protocol進行。