來源 | 用途 | 抗體識別位點 | 抗體類型 |
Mouse | WB, IP, IF | Flag tag | IgG1 |
WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence.
本Flag抗體(Flag antibody)為進口分裝,用經過適當修飾的人工合成Flag tag多肽DYKDDDDK作為抗原,然后用protein G和抗原多肽親和柱經過兩步純化得到的高純度單克隆抗體,克隆號為M2。
本Flag抗體廣泛地用于Flag tag(DYKDDDDK)融合表達蛋白的檢測。本抗體可以檢測位于融合蛋白N-terminal或C-terminal的Flag tag,也可以檢測位于融合蛋白內部的Flag tag。
DNA重組技術使給目標蛋白帶上特定tag成為可能,這些常用的tag包括myc、HA、Flag、His、GST等。帶上tag后,通常不會影響目標蛋白的生物活性和細胞內定位。但檢測和tag融合表達的目標蛋白時,使用商業化的相應tag抗體就可以完成,大大方便了很多實驗檢測。
本Flag抗體可用于檢測和Flag tag融合表達蛋白的表達、細胞內定位,以及純化、定性或定量檢測Flag tag融合表達蛋白等。
配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據抗原水平的高低作適當調整):
WB | IP | IF |
1:1000 | 1:100 | 1:1000 |
本抗體如果用于常規的Western檢測,至少可以檢測40次。
包裝清單:
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
AF519-1 | Flag抗體(小鼠單抗) | 40μl |
AF519-2 | Western一抗稀釋液 | 40ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
Flag抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導致出現輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項:
在Western實驗后,請注意回收稀釋的抗體;厥盏目贵w在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體,包括已經使用過的稀釋抗體,4℃保存。
回收后重復使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發現抗體出現輕微混濁現象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續檢測。如果回收的抗體出現明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. Western檢測:
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時,確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續使用。
D. 按照Western的實驗步驟進行后續的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。
2. 免疫染色:
可以使用生產的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,
3. 其它實驗操作請自行參考適當的protocol進行。