來(lái)源 | 用途 | 交叉反應(yīng)性 | 抗體類(lèi)型 | ERp44分子量 |
Rabbit | WB, IHC-P | H, M, R, Mk | IgG | ~44kD |
WB,Wester blot; IHC-P,Immunohistochemistry (Paraffin).
H, human; M, mouse; R, rat; Mk, monkey.
本ERp44抗體(ERp44 antibody,即Endoplasmic reticulum resident protein 44 antibody,又稱(chēng)Thioredoxin domain-containing 4 antibody,或TXNDC4 antibody)為進(jìn)口分裝,用人工合成的人ERp44的一段多肽進(jìn)行適當(dāng)修飾后免疫rabbit,制備而成的rabbit單克隆抗體。克隆號(hào)為D17A6。
本ERp44抗體識(shí)別的是總ERp44(total ERp44),可以檢測(cè)內(nèi)源性的ERp44。
ERp44(Endoplasmic reticulum resident protein 44),也稱(chēng)為T(mén)hioredoxin domain-containing 4 (TXNDC4),是一類(lèi)含有thioredoxin結(jié)構(gòu)域的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白,常被用作內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的標(biāo)志蛋白。分泌蛋白合成后轉(zhuǎn)位至內(nèi)質(zhì)網(wǎng),并在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中完成翻譯后修飾和正確折疊。很多分泌蛋白形成其天然構(gòu)象的過(guò)程中,都需要形成分子間和分子內(nèi)的二硫鍵。這種過(guò)程被稱(chēng)為氧化蛋白折疊(oxidative protein folding)。二硫鍵異構(gòu)酶Disulfide isomerase(PDI)含有兩個(gè)thioredoxin結(jié)構(gòu)域,可催化這些二硫鍵的形成和異構(gòu)化。ERp44與其它具有thioredoxin結(jié)構(gòu)域的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白共同組成了PDI家族。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可誘導(dǎo)ERp44產(chǎn)生,ERp44可通過(guò)二硫鍵與Ero1-Lα和Ero1-Lβ相連。研究表明ERp44介導(dǎo)了Ero1-Lα的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位。
配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測(cè)時(shí)的一抗稀釋。
建議抗體使用時(shí)的稀釋比例如下(實(shí)際使用時(shí)需根據(jù)抗原水平的高低作適當(dāng)調(diào)整):
WB | IHC-P |
1:1000 | 1:800 |
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測(cè),至少可以檢測(cè)20次。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 包裝 |
AE851-1 | ERp44抗體(兔單抗) | 20μl |
AE851-2 | Western一抗稀釋液 | 20ml |
— | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
保存條件:
ERp44抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存,長(zhǎng)期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項(xiàng):
對(duì)于本抗體,Western檢測(cè)時(shí)一抗要4℃緩慢搖動(dòng)過(guò)夜,如果僅短時(shí)間與一抗孵育檢測(cè)效果較差。
在Western實(shí)驗(yàn)后,請(qǐng)注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進(jìn)行Western實(shí)驗(yàn)時(shí)至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體,包括已經(jīng)使用過(guò)的稀釋抗體,4℃保存。
回收后重復(fù)使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測(cè)。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長(zhǎng)霉長(zhǎng)菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說(shuō)明:
1. Western檢測(cè):
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經(jīng)過(guò)封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動(dòng)過(guò)夜或室溫緩慢搖動(dòng)2小時(shí),確保稀釋的抗體至少能在搖動(dòng)的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續(xù)使用。
D. 按照Western的實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行后續(xù)的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測(cè)等操作。
2. 免疫染色:
可以使用生產(chǎn)的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,
3. 其它實(shí)驗(yàn)操作請(qǐng)自行參考適當(dāng)?shù)膒rotocol進(jìn)行。