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GSK-3β抗體(兔單抗)

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來源 用途 交叉反應性 抗體類型 GSK-3β分子量
Rabbit WB, IP, IHC H, M, R, Mk IgG ~46kD

      WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IHC, Immunohistochemistry.
      H, human; M, mouse; R, rat; Mk, monkey.
      本GSK-3β抗體(GSK-3β antibody,Glycogen synthase kinase-3β antibody)為進口分裝,用經過適當修飾的人工合成的人GSK-3β中的一段多肽作為抗原制備而成的抗GSK-3β兔單克隆抗體。克隆號為27C10。
      本GSK-3β抗體識別的是總GSK-3β(total GSK-3β),可以檢測內源性的GSK-3β。未發現和其它激酶有交叉反應。
      Glycogen synthase kinase-3,即糖原合成酶激酶-3,簡稱GSK-3,是一種廣泛表達的serine/threonine蛋白激酶。GSK-3包括51kD的GSK-3α和46kD的GSK-3β,兩者有85%的氨基酸相似性。GSK-3最初被發現可以被胰島素信號通路調控,可以磷酸化糖原合成酶(glycogen synthase)并使之失活。GSK-3是PI3 kinase/Akt信號通路的關鍵下游蛋白,Akt可以磷酸化GSK-3α的Ser21和GSK-3β的Ser9,并抑制它們的酶活性。這樣在飲食誘導胰島素分泌的情況下,胰島素誘導Akt磷酸化,隨后GSK-3β被Akt所磷酸化抑制,導致糖原合成酶磷酸化水平下降,糖原合成酶活性升高,糖原合成增加,從而降低血糖。GSK-3β在能量代謝、體型發育(body pattern development)和神經細胞發育過程中起重要作用。GSK-3β可以磷酸化β-catenin并調控Wnt信號通路,還可以調節cyclin D1的蛋白降解和細胞內定位。
      配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
      建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據抗原水平的高低作適當調整):

WB IP IHC
1:1000 1:50 1:100

      本抗體如果用于常規的Western檢測,至少可以檢測20次。
包裝清單:

產品編號 產品名稱 包裝
AG751-1 GSK-3β抗體(兔單抗) 20μl
AG751-2 Western一抗稀釋液 20ml
說明書 1份

保存條件:
      GSK-3β抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導致出現輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項:
      對于本抗體,Western檢測時一抗要4℃緩慢搖動過夜,如果僅短時間與一抗孵育檢測效果較差。
      在Western實驗后,請注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體,包括已經使用過的稀釋抗體,4℃保存。
      回收后重復使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發現抗體出現輕微混濁現象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續檢測。如果回收的抗體出現明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
      本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
      為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

使用說明:
1. Western檢測:
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時,確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續使用。
D. 按照Western的實驗步驟進行后續的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。
2. 免疫染色:
可以使用生產的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,
3. 其它實驗操作請自行參考適當的protocol進行。

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