來源 | 用途 | 交叉反應性 | 抗體類型 | Fibrillarin分子量 |
Rabbit | WB, IF-IC | H, M, R, Mk | IgG | ~37kD |
WB, Western blot; IF-IC, Immunofluorescence-immunocytochemistry.
H, human; M, mouse; R, rat; Mk, monkey.
本Fibrillarin抗體(Fibrillarin antibody)為進口分裝,用經過適當修飾的人工合成的人FibrillarinThr298附近一段多肽作為抗原制備而成的抗Fibrillarin兔單克隆抗體。克隆號為C13C3。
本Fibrillarin抗體識別的是總Fibrillarin(total Fibrillarin),可以檢測內源性的Fibrillarin。
Fibrillarin是一種2'-O-甲基轉移酶,主要定位于核仁中,即RNA轉錄和pre-RNA加工區(qū)域。Fibrillarin與幾種結構蛋白、box C/D snoRNA形成復合物,在pre-rRNA加工和甲基化、核糖體組裝(ribosome assembly)過程中發(fā)揮重要作用。該復合物可以催化rRNA序列特異的2'-O-ribose甲基化。Fibrillarin的序列、結構和功能高度保守,Fibrillarin的基因表達對早期胚胎發(fā)育有重要作用,基因敲除會出現胚胎致死。酵母中的fibrillarin的同源蛋白為Nop1p,也定位在核仁中,和18S rRNA的加工成熟有關。自身免疫疾病硬皮病患者的血清中通常含有較高水平的fibrillarin抗體。
Fibrillarin被廣泛用作核仁定位的標記蛋白(protein marker for nucleoli)。
配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據抗原水平的高低作適當調整):
WB | IF-IC |
1:1000 | 1:400 |
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測,至少可以檢測20次。
包裝清單:
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
AF380-1 | Fibrillarin抗體(兔單抗) | 20μl |
AF380-2 | Western一抗稀釋液 | 20ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
Fibrillarin抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導致出現輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項:
對于本抗體,Western檢測時一抗要4℃緩慢搖動過夜,如果僅短時間與一抗孵育檢測效果較差。
在Western實驗后,請注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體,包括已經使用過的稀釋抗體,4℃保存。
回收后重復使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發(fā)現抗體出現輕微混濁現象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
1. Western檢測:
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時,確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗,4℃保存以備下次繼續(xù)使用。
D. 按照Western的實驗步驟進行后續(xù)的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。
2. 免疫染色:
可以使用生產的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體,使用后注意回收稀釋好的一抗,
3. 其它實驗操作請自行參考適當的protocol進行。