WB,Western blot;IF,Immunofluorescence;IHC,Immunohistochemistry;IP,Immunoprecipitation;ChIP,
Chromatin Immunoprecipitation.
      H, human; M, mouse; R, rat; Mk, Monkey.
      本Di-Methyl-Histone H3抗體(Di-Methyl-Histone H3 antibody)為進(jìn)口分裝，用人工合成的histone H3氨基端的含有雙甲基化Lys4的一段多肽經(jīng)過適當(dāng)修飾后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽親和柱經(jīng)過兩步純化得到的高純度單克隆抗體�？寺√枮镃64G9。
      本Di-Methyl-Histone H3(Lys4)抗體識別的是總Di-Methyl-Histone H3(Lys4)，可以檢測內(nèi)源性的Lys4雙甲基化的histone
H3，未發(fā)現(xiàn)和Lys4非甲基化的histone H3、Lys4單甲基化的histone H3或Lys4三甲基化的histone H3有交叉反應(yīng)。另外，本抗體與Lys9，Lys27，Lys36二甲基化或三甲基化的histone H3或Lys20二甲基化或三甲基化的histone H4都沒有交叉反應(yīng)。
      組蛋白histone H2A，H2B，H3和H4各兩個分子組成的八聚體和與該八聚體相結(jié)合的DNA構(gòu)成了染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)核小體(necliosome)。組蛋白的存在確保了基因組DNA可以被相對致密而有序地堆放在細(xì)胞核中。人一個細(xì)胞的基因組DNA完全拉成線性的總長度約為1.4米，但染色質(zhì)的總長度僅為9厘米，而有絲分裂時染色體的總長度僅為0.12毫米。除了核心組蛋白(core histone)histone H2A，H2B，H3和H4外，還有一類linker histone H1和H5。Histone H1可以結(jié)合核小體和DNA在核小體中進(jìn)出的位點，從而使DNA的位置被鎖定，有利于在核小體基礎(chǔ)上形成更高級的空間結(jié)構(gòu)(參考下圖)。組蛋白結(jié)合區(qū)域的DNA長度為147bp，核小體間的DNA長度大約為50bp。染色質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的松散還是致密很大程度上決定了該區(qū)域基因轉(zhuǎn)錄水平的高低(參考下圖)。

      組蛋白是真核生物中呈強(qiáng)堿性的蛋白。組蛋白可以被乙�；�、磷酸化、甲基化和泛素化修飾。這些修飾會改變?nèi)旧�質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，從而在基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、染色體裝配等過程中起重要作用。通常，histone H2B的Lys5，Lys12和Lys15會發(fā)生乙酰化修飾。Histone H3的Lys9，Lys14，Lys18和Lys23會發(fā)生乙酰化修飾。Histone H3的Ser10，Ser28和Thr11都會發(fā)生磷酸化修飾。
Histone H3的這些磷酸化和有絲分裂或減數(shù)分裂過程中的染色質(zhì)濃縮密切相關(guān)。Histone H3 Thr3的磷酸化在很多物種中都非常保守，可以被激酶haspin所催化。Histone H3的Thr3磷酸化發(fā)生在有絲分裂早期(prophase)，在有絲分裂的晚期(anaphase)則被去磷酸化。Histone H3和H4是甲基化修飾的主要組蛋白，哺乳動物細(xì)胞中histone H3和H4是高度甲基化的。組蛋白可以被單、雙或三甲基化(mono-,di-,and tri-methylated)，和基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控和染色體裝配密切相關(guān)。Histone H3的Lys4二或三甲基化和很多基因的轉(zhuǎn)錄激活相關(guān)。Histone H3的Lys4二甲基化和三甲基化和基因的轉(zhuǎn)錄激活密切相關(guān)。盡管Lys4二甲基化的histone H3也在非轉(zhuǎn)錄激活區(qū)被檢測到，Lys4二甲基化和三甲基化的histone H3在異染色質(zhì)中是檢測不到的。Histone H3的Lys9單甲基化和二甲基化和基因沉默和異染色質(zhì)裝配有關(guān)，而Lys9三甲基化的Histone H3在異染色質(zhì)的pericentric domain區(qū)域富集。
      Histone H3在其氨基端有一個較長的N terminal tail，在核小體的裝配過程中起關(guān)鍵作用。Histone H3是各種histone中修飾程度最高的，在表觀遺傳(epigenetics)中起重要作用。Histone H3包括H3A1、H3A2和H3A3。人的hitone H3由近15個基因分別單獨編碼。
      配套提供了Western一抗稀釋液，可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
      建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據(jù)抗原水平的高低作適當(dāng)調(diào)整)：

      本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測，至少可以檢測20次。
包裝清單：

保存條件：
      Di-Methyl-Histone H3(Lys4)抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項：
      對于本抗體，Western檢測時一抗要4℃緩慢搖動過夜，如果僅短時間與一抗孵育檢測效果較差。
      在Western實驗后，請注意回收稀釋的抗體�；厥盏目贵w在進(jìn)行Western實驗時至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體，包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體，4℃保存。
      回收后重復(fù)使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。
      本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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