本堿性磷酸酯酶標記Streptavidin(AP-labeled Streptavidin)也稱AP-Streptavidin、Streptavidin-AP或堿性磷酸酯酶標記鏈霉親和素,為進口分裝,可以用于生物素(Biotin)標記的抗體、核酸、蛋白或其它生物素標記分子的檢測。具體用途包括Western、ELISA、免疫組化或免疫細胞化學、原位雜交、Southern、Northern、EMSA等。
本AP-Streptavidin用高純度的Streptavidin和超純的堿性磷酸酯酶交聯而成,確保產生極低的本底和非常高的靈敏度。本產品的濃度為1mg/ml。
Streptavidin的分子量為66kD,可以高度特異性地和生物素(Biotin)結合。Streptavidin和生物素的親和常數為 Kd=10-15M。Streptavidin是一個4聚體蛋白,可以同時結合4個生物素分子。Streptavidin的中文名為鏈霉親和素,從Streptomyces adidinii中純化獲得,和雞蛋清來源的Avidin(親和素)在空間結構以及與生物素的親和力方面具有高度的相似性。和Avidin不同的是,Streptavidin是一種非糖基化蛋白,并且基本不帶電荷。Avidin的pI=~10.5,在中性pH條件下呈堿性。由于Streptavidin和Avidin相比在中性條件下不帶電荷,因此Streptavidin的非特異性結合比Avidin低很多,這樣檢測時的非特異性背景就低很多。因此目前在生物素檢測時通常使用Streptavidin替代Avidin。
堿性磷酸酯酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)常被稱作堿性磷酸酶(EC 3.1.3.1),是一類水解酶,通過水解磷酸單酯將底物分子上的磷酸基團除去,并生成磷酸根離子和自由的羥基,其去磷酸化作用的底物包括蛋白質、核苷酸和生物堿等,并在堿性條件下最為有效。該酶是一組同功酶的統稱。常見的小牛腸堿性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline Phosphatase, CIAP/CIP)被廣泛用于二抗等的標記最終用于蛋白和核酸等的檢測,例如在Western、ELISA、IHC、ICC、EMSA、Northern、Southern等時,催化BCIP/NBT等顯色試劑顯色或催化適當的化學發光試劑產生化學發光。本產品標記的就是小牛腸堿性磷酸酶。
本堿性磷酸酯酶標記Streptavidin用于各種常規用途的推薦稀釋比例參考下表,實際實驗操作過程中需根據具體情況適當調節堿性磷酸酯酶標記Streptavidin的稀釋比例。對于Western,推薦的稀釋范圍為1:2000-10000。
WB | IHC/IC/ISH | ELISA | Southern/Northern | EMSA |
1:2000-5000 | 1:150-500 | 1:2000-5000 | 1:2000-5000 | 1:2000-5000 |
WB, Western blot; IHC, Immunohistochemistry; IC, Immunocytochemistry; ISH, in situ hybridization.
本產品如果用于常規的Western檢測,以每次檢測需10毫升1:2000稀釋的本產品計,可以檢測40次。
包裝清單:
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
A0312 | 堿性磷酸酯酶標記Streptavidin | 0.2ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
-20℃保存,一年有效。
注意事項:
本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。