pShuttle-CMV-C-FLag是自行研發的用于在哺乳動物細胞中表達C端FLag tag(FLag標簽)融合蛋白的重組腺病毒包裝用的穿梭質粒。本穿梭質粒構建后，需要和預轉染了pAdEasy-1質粒的BJ5183菌株(D8107)以及重組腺病毒包裝細胞配合使用才能完成重組腺病毒的包裝。
pShuttle-CMV-C-FLag含有CMV啟動子可以高效啟動目的蛋白在細胞中的表達；在多克隆位點的3'端含有一個可以編碼Flag標簽的序列，因此可以表達出含有Flag標簽的融合蛋白，可以方便地使用抗Flag的抗體來識別目的蛋白，有利于目的蛋白檢測和分離純化。
本質粒為卡那霉素抗性。
重組腺病毒(Recombinant adenoviruses)是一種常見的用于在培養細胞或動物體內表達外源基因的重要工具。重組腺病毒具有感染宿主細胞范圍廣、感染不依賴細胞分裂、高滴度及目的基因表達水平高等特性。最常用的腺病毒載體是人類血清5型腺病毒。改造后的人類血清5型腺病毒，刪除了在病毒裝配過程中起關鍵作用的E1基因和非必須的能表達逃避宿主免疫的E3基因，E1和E3基因的刪除使得重組腺病毒不能自我復制，同時給外源基因的插入提供了空間，最長可插入7.5kb的外源基因。從而提高了重組腺病毒的的安全性和可操作性。再利用攜帶E1基因的AD-293、293A、HEK293等細胞作為包裝細胞就可以完成重組腺病毒的包裝。
pShuttle系列的穿梭質粒攜帶外源目的基因，經過Pme I線性化，隨后與腺病毒骨架質粒pAdEasy-1(D8106)共轉化到大腸桿菌BJ5183中，或者轉化到已經預轉化了pAdEasy-1質粒的BJ5183菌株(D8107)中同源重組。BJ5183菌株表達recET基因，具有很高的基因同源重組(homologous recombination)活性，使帶有目的基因的穿梭質粒與腺病毒骨架質粒pAdEasy-1通過末端反向重復序列同源重組，實現外源基因與腺病毒基因組的整合。將重組的攜帶外源基因的腺病毒質粒用Pac I線性化后轉染到AD-293、293A、HEK293等重組腺病毒包裝細胞中進行包裝。從而制備獲得高滴度、自我復制缺陷并且帶有目的基因的重組腺病毒。
目的基因引入時不能含有Pme I及Pac I這兩個酶切位點，如果含有該兩個酶切位點的目的基因，需要對該位點進行突變方可進行基因操作。
pShuttle-CMV-C-FLag質粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| left inverted terminal repeat | 1–103 |
| encapsidation signal (ES) | 183–331 |
| CMV promoter | 341–933 |
| multiple cloning site | 940–994 |
| FLag tag | 999-1025 |
| SV40 polyA | 1045–1251 |
| Ad5 right arm homology | 1256–3510 |
| Ad5 left arm homology | 3558–4441 |
| right inverted terminal repeat | 4442–4544 |
| pBR322 origin | 4752–5419 |
| kanamycin resistance ORF | 6228–7019 |
pShuttle-CMV-C-Flag質粒的圖譜如下：
pShuttle-CMV-C-FLag質粒的詳細圖譜見說明書：https://www.beyotime.com/Manual/D8119 pShuttle-CMV-C-FLag.pdf。
pShuttle-CMV-C-FLag中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pShuttle-CMV-C-FLag)包括：
| Acc65 I | Afl II | Age I | Asc I | Asp718 |
| Blp I | BsiC I | BsiW I | BstB I | Bsu36 I |
| Cla I | Eco72 I | EcoN I | Esp I | Fse I |
| Kpn I | Nru I | Pml I | Pvu I | Sfi I |
pShuttle-CMV-C-FLag中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pShuttle-CMV-C-FLag once)包括：
| BsrG I | T`GTAC,A | 193 | Hpa I | GTT|AAC | 1155 |
| SnaB | ITAC|GTA | 679 | PflM I | CCAN,NNN`NTGG | 1933 |
| Nhe I | G`CTAG,C | 940 | BstX I | CCAN,NNNN`NTGG | 2372 |
| Not I | GC`GGCC,GC | 945 | Bbs I | GAAGAC 8/12 | 3174 |
| BamH I | G`GATC,C | 952 | Bbv II | GAAGAC 7/11 | 3175 |
| Hind III | A`AGCT,T | 958 | Bst1107 I | GTA|TAC | 3528 |
| EcoR V | GAT|ATC | 966 | Xca I | GTA|TAC | 3528 |
| Sal I | G`TCGA,C | 970 | Pme I | CTTT|AAAC | 3549 |
| Mlu I | A`CGCG,T | 976 | EcoR I | G`AATT,C | 3554 |
| Bgl II | A`GATC,T | 982 | Avr II | C`CTAG,G | 4096 |
| PaeR7 I | C`TCGA,G | 988 | BspH I | T`CATG,A | 5492 |
| Xho I | C`TCGA,G | 988 | Psp1406 I | AA`CG,TT | 5891 |
| Xba I | T`CTAG,A | 994 | Rsr II | CG`GWC,CG | 6897 |
| Spe I | A`CTAG,T | 1033 | Dra III | CAC,NNN`GTG | 7244 |
| Sca I | AGT|ACT | 1038 | Xmn I | GAANN|NNTTC | 7498 |
pShuttle-CMV-C-FLag質粒中推薦使用的測序引物序列如下：
forward primer (888-907): 5´GGTCTATATAAGCAGAGCTG3´
Reverse primer (1047-1069): 5´GTGGTATGGCTGATTATGATCAG 3´
pShuttle-CMV-C-FLag 的全序列信息:pShuttle-CMV-C-FLag.txt。
包裝清單：
| 產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
| D8119-1µg | pShuttle-CMV-C-Flag | 1μg |
| D8119-100µg | pShuttle-CMV-C-Flag | 100μg |
| — | 說明書 | 1份 |
保存條件：
-20℃保存。
注意事項：
本質粒未經書面許可不得用于任何商業用途，也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人或單位。
本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1.首次使用1µg包裝的本產品時，請先取少量本質粒轉化大腸桿菌，進行質粒小量、中量或大量抽提后再用于后續用途。抽提獲得的質粒可以通過酶切電泳進行鑒定，或通過測序進行鑒定。
2.pShuttle-CMV-C-FLag質粒在其多克隆位點適當酶切后可以插入待表達的目的基因，插入目的基因時注意與FLag不能發生移碼突變。攜帶目的基因的質粒經過Pme I線性化，隨后與腺病毒骨架質粒pAdEasy-1(D8106)共轉化到大腸桿菌BJ5183中，或者轉化到已經已經預轉了pAdEasy-1質粒的BJ5183菌株(D8107)中進行同源重組。將重組的攜帶外源基因的腺病毒質粒用Pac I線性化后轉染到AD-293、293A、HEK293等重組腺病毒包裝細胞中進行包裝。從而制備得高滴度、自我復制缺陷并且帶有目的基因的重組腺病毒
