產品及特點
內毒素(即lipopolysaccharides,LPS)是E.coli細胞壁的主要成分,傳統的去除內毒素的方法是將內毒素和DNA一起純化出來,然后再用各種方法去除其中的內毒素,操作繁瑣,DNA回收率低。本產品可以直接把E.coli表面的內毒素去除, 從根本上避免了內毒素對后續操作(如質粒DNA提取,重組蛋白質提。┑奈廴。本產品具有下列特點:
1.首個在菌體收集階段去除內毒素的產品,從源頭上避免了內毒素跟DNA和胞漿蛋白的接觸,從根本上防止了可能產生的污染。
2.操作簡單快速,用酶溶液溫和清洗菌體3-4次即可去掉細菌表面的內毒素,只需要10分鐘左右時間,不需要復雜儀器設備。
3.高效,能去除99%以上的內毒素。
4.跟各種質粒DNA提取、基因組DNA提取和蛋白質提取等操作兼容,DNA丟失率只有10%左右(其他方法DNA丟失率可以高達50%)。
5.不影響DNA和絕大部分蛋白質的活性,處理過的質粒DNA可用于轉染實驗。
6.既可小規模使用(在1.5 mL離心管內),也可放量用于大規模無內毒素質粒DNA 提取和無內毒素蛋白質純化。
使用及效果
將1.5-3 mL E.coli飽和菌液離心后棄上清,得到細菌沉淀,加入1 mL本產品溫和混勻后10000-12000 g離心1分鐘,棄上清(含內毒素),重復上述操作2-3次, 得到的菌體可以直接進入后續的質粒DNA提取或蛋白質提取程序。產品及特點
內毒素(即lipopolysaccharides,LPS)是E.coli細胞壁的主要成分,傳統的去除內毒素的方法是將內毒素和DNA一起純化出來,然后再用各種方法去除其中的內毒素,操作繁瑣,DNA回收率低。本產品可以直接把E.coli表面的內毒素去除, 從根本上避免了內毒素對后續操作(如質粒DNA提取,重組蛋白質提。┑奈廴尽1井a品具有下列特點:
1.首個在菌體收集階段去除內毒素的產品,從源頭上避免了內毒素跟DNA和胞漿蛋白的接觸,從根本上防止了可能產生的污染。
2.操作簡單快速,用酶溶液溫和清洗菌體3-4次即可去掉細菌表面的內毒素,只需要10分鐘左右時間,不需要復雜儀器設備。
3.高效,能去除99%以上的內毒素。
4.跟各種質粒DNA提取、基因組DNA提取和蛋白質提取等操作兼容,DNA丟失率只有10%左右(其他方法DNA丟失率可以高達50%)。
5.不影響DNA和絕大部分蛋白質的活性,處理過的質粒DNA可用于轉染實驗。
6.既可小規模使用(在1.5 mL離心管內),也可放量用于大規模無內毒素質粒DNA 提取和無內毒素蛋白質純化。
使用及效果
將1.5-3 mL E.coli飽和菌液離心后棄上清,得到細菌沉淀,加入1 mL本產品溫和混勻后10000-12000 g離心1分鐘,棄上清(含內毒素),重復上述操作2-3次, 得到的菌體可以直接進入后續的質粒DNA提取或蛋白質提取程序。
圖注:鱟試劑檢測結果。1號為內毒素濃度為
0.1 EU/mL 的 鱟 試 劑 盒 標 準 溶 液 ; 2號是稀釋500倍的、從未處理E.coli 中提取的質粒DNA,內毒素含量是380 EU/mL(=9.05 EU/ μg DNA);3號是稀釋了500倍的、從本產品處理過的E.coli中提取的質粒DNA,內毒素含量 是 6.5 EU/mL(=0.18 EU/ μg DNA);4 號 為鱟試劑盒標中的無內毒素水(陰性對照)(實驗編號:305078)。
圖注:左邊兩個質粒DNA樣品是從用本產品處理后的E.coli中提取的,右邊兩個是從為未處理的E.coli中提取的。質粒提取使用的是柱式質粒DNAOUT,洗脫量是100 μL, 上樣量是10 μL。電泳染料為的綠如藍。處理過的細菌的質粒DNA產率比沒處理的低10%左右(實驗編號:305070)。