本產(chǎn)品是在本公司血液DNAout產(chǎn)品基礎(chǔ)上開發(fā)的、專門用于從新鮮或冷凍的哺乳動(dòng)物抗凝全血中同時(shí)提取細(xì)胞核DNA和線粒體DNA的試劑。
本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 一份樣品可以同時(shí)得到細(xì)胞核DNA和線粒體DNA,節(jié)約寶貴的實(shí)驗(yàn)材料。
2. DNA產(chǎn)率高。細(xì)胞核DNA產(chǎn)率一般為30-50 ug/mL新鮮血液,線粒體DNA產(chǎn)率約為1 ug/mL新鮮血液。陳舊血液DNA產(chǎn)率差別較大。
3. DNA純凈,OD260/OD280在1.8-2.0之間,可直接用于PCR、酶切、雜交等實(shí) 驗(yàn)。
4. 適用于哺乳動(dòng)物血液,不適用于其他動(dòng)物血液。
所用試劑安全無毒,健康環(huán)保
血液樣品制備白細(xì)胞核和線粒體沉淀步驟詳見產(chǎn)品使用手冊。白細(xì)胞、線粒體DNA提取步驟如下:取血液白細(xì)胞沉淀或線粒體沉淀加入0.5 mL溶液A,吹打混勻,加入75 uL溶液B,55℃溫育10分鐘。加入0.2 mL溶液C,顛倒混勻。4℃,13000g離心20分鐘,取上清。在上清中加入兩倍體積的無水乙醇,震蕩混勻,室溫13000 g離心5分鐘,棄上清。加入1 mL 75%乙醇,充分混勻,室溫13000g離心5分鐘,棄上清。短暫離心,去盡殘留溶液。加入適量DNA洗脫液2.0溶解DNA,65℃保溫15分鐘。溶解后的DNA即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)或者-20℃?zhèn)溆谩?/p>
用本產(chǎn)品提取1 mL兔全血(左圖)和0.1mL雞全血的核DNA(右圖)然后分別溶于50 μL和250 μL TE中,取10μL上樣,電泳10分鐘后直接在UV燈下照相