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糞便DNAOUT

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 動物糞便中夾雜著許多脫落的腸道上皮細(xì)胞,還可能有腸道病原菌,因此通過PCR對糞便DNA進(jìn)行分析是診斷腸道遺傳病(如大腸癌等)和腸道傳染病的重要方法,具有比常規(guī)的結(jié)腸鏡檢測和大便隱血實(shí)驗(yàn)更高的特異性和靈敏度。通過PCR 對糞便DNA進(jìn)行分析還可以對瀕危物種進(jìn)行跟蹤和遺傳分析。但糞便中成分復(fù)雜多變,常含有對PCR等后續(xù)反應(yīng)有極大的抑制作用的不明成分,所以從糞便中提取高純度的DNA十分棘手。本產(chǎn)品是針對這一問題推出的、專門用于從各種動物糞便中提取DNA的試劑。其特點(diǎn)如下:

1. DNA純凈,OD260/280一般都在1.8以上,得到的DNA樣品原液或稀釋液可

以直接用于PCR擴(kuò)增。

2. 每次微量提取可以處理100-300 mg左右的樣品,能得到5 μg 左右DNA,片段長度在30 Kb左右。

3. 可以同時(shí)提取到腸道上皮細(xì)胞和可能的腸道病原菌的DNA。

4. 操作過程簡單快速,只需要30分鐘。

5. 擴(kuò)容性好,既可以在1.5 mL離心管中微量提取,也可以在50 mL離心管中進(jìn)行大規(guī)模制備。

試劑無毒無害,環(huán)保。

將0.1-0.3克左右的樣品與500 μL溶液A混合,劇烈振蕩5-10分鐘,65℃保溫5 分鐘,離心2分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中,加入500 μL溶液B,冰浴5分鐘, 離心2分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中,加入200 μL氯仿,振蕩30秒混勻,離心2分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中,加入2倍體積的乙醇,混勻后離心10分鐘,
棄上清,1 mL 75%乙醇洗兩次即得DNA
用和本產(chǎn)品分別從約300 mg動物糞便中提取DNA,最后得到的DNA溶液為50 μL,15 μL用于電泳, 使用的染料為綠如藍(lán), 兩份樣品完全相同。
 
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