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柱式酵母質粒DNAOUT

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本產品是專門用于提取酵母質粒DNA的產品(不適用于酵母dsRNA質粒)。本

產品根據酵母細胞壁十分堅硬的特點,在細菌質粒堿裂解法的基礎上,增加了高效

裂解酵母細胞壁的預處理步驟,可在1小時左右得到高純的酵母質粒DNA,可以用

于PCR或轉化。

1. 快速,整個過程只需要一個小時左右,可同時處理多個樣品。

2. 得到的酵母質粒DNA純度高,可直接用于轉化和PCR等實驗。

3. 可以從平板上的菌斑或液體培養的酵母中抽提質粒DNA。

4. 安全,不需使用玻璃珠、酚、氯仿等試劑。

5. 每5 mL酵母培養液一般可以提取到1 μg左右的高拷貝酵母質粒DNA。

6. 即開即用,經濟實惠,客戶自己不需要準備額外的試劑。

將5-10 mL過液培養的酵母培養液(或細胞數目相當的菌落)離心,在細胞沉淀

中加0.3 mL溶液A并混合均勻,95℃10分鐘,離心收集沉淀,加入0.25 mL溶液B并

混合均勻,37 30-60分鐘,再加入0.25 mL溶液C并輕柔顛倒混勻,室溫放置10分

鐘,再加入0.35 mL溶液D并輕柔顛倒混勻,冰浴放置30分鐘,離心,上清液上柱后

室溫放置10分鐘,離心,棄穿透液,再用0.5 mL通用洗柱液洗兩次,最后用DNA洗

脫液將DNA洗脫。

Q:為何酵母質粒DNA產率很低?

A:除YEp類質粒以外的酵母質粒的拷貝數都很低,所以從5-10 mL酵母培養液中

得到的質粒DNA一般都不足1 μg。但大部分酵母質粒都是穿梭質粒,所以大規

模制備可以在E.coli中進行。​​

 

 

 

 

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