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海量PCR片段純化試劑盒

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 本試劑盒可用于海量PCR產物回收。在大規模制備PCR產物時(如DNA Marker的制備),往往需要回收毫克級的PCR片段,如果使用傳統的大提柱式法, 由于需要加3倍體積的上柱液,一次純化實際處理量只有5-6 mL PCR反應液。此外,由于需要多次(一般需要4-6次)洗脫才能將PCR片段全部從離心吸附柱上回收,得到的PCR片段濃度很難控制(一般都較稀)。為解決上述問題,本公司特開發出本產品,其流程如下:

 

本試劑盒可用于海量PCR產物回收。在大規模制備PCR產物時(如DNA Marker的制備),往往需要回收毫克級的PCR片段,如果使用傳統的大提柱式法, 由于需要加3倍體積的上柱液,一次純化實際處理量只有5-6 mL PCR反應液。此外,由于需要多次(一般需要4-6次)洗脫才能將PCR片段全部從離心吸附柱上回收,得到的PCR片段濃度很難控制(一般都較稀)。為解決上述問題,本公司特開發出本產品,其流程如下:

PCR反應產物中,加入0.1倍體積的溶液A,搖晃混勻后室溫放置5分鐘, 10000 g離心10分鐘,棄上清,加入跟PCR溶液等體積的溶液B,搖晃混勻后

10000 g離心兩分鐘,所得沉淀即為回收的PCR片段,溶于適量溶液即可。

 

一次純化800 μg PCR產物效果圖

 

 

圖注:左一為100 bp DNA Ladder。左二是用本產品純化25 mL PCR反應液得到的長為250 bp的DNA產物, DNA最后溶于2 mL TE中,DNA總量為800 μg,此處上樣量為5 μL。左三是左二沉淀的上清用乙醇沉淀法回收DNA后沉淀全部上樣,沒有DNA條帶說明本法沉淀回收DNA徹底。電泳染料為本公司綠如藍染料(實驗編號:

304270)。

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