本產品是獨家開發的革命性的DNA膠回收試劑,其最大特點是可以直接從溶化的瓊脂糖凝膠中沉淀回收DNA,不使用離心吸附柱,沒有樣品轉移過程, 所以它能將對DNA的機械拉力降低到最低,尤其適合于回收長達5-50 Kb的大片段DNA(常規的離心吸附柱不能有效回收5 Kb以上DNA)。本產品操作流程如下
本產品主要特點是:
1.一管式操作,不需要離心吸附柱,過程中不需要轉移樣品,對DNA的機械破壞小。
2.適合于回收從100 bp到50 Kb的各種大小的DNA片段,包括用常規離心吸附柱方法不能有效回收的5 Kb以上的質粒,BAC、基因組DNA等片段。
3.快速,整個過程不到15分鐘(對一個樣品而言),由溶膠(3分鐘),放置(2 分鐘),沉淀(5分鐘)和兩次洗滌(各1-2分鐘)幾步組成。
4.純度高,回收產物可以直接用于連接、酶切、PCR、測序等各種反應,不影響后續酶反應。回收率高,一般在大于50%。
5.既可用于回收單雙鏈DNA,又可用于回收單雙鏈RNA。
使用及效果
按3:1的比例將溶液A和含DNA片段的瓊脂糖凝膠塊在離心管中混合(一片膠一般需要300 μL溶液A),65℃保溫3-10分鐘使膠融化,加入1倍體積(100 μL)的溶液B,充分混勻,室溫放2分鐘,13000 g室溫離心5分鐘,小心吸棄上清,加入
0.8mL溶液C,充分混勻,室溫13000 g離心2分鐘,再用0.2 mL溶液C重復洗滌步驟一次,小心吸棄上清后即得純化的DNA沉淀,溶于TE中待用。