本產品是基于TdT末端轉移酶能夠在DNA的3端添加dNTP尾巴的原理設計,其示意圖如下
本產品在上述原理的基礎上本產品的特點是:
1. 快速,10分鐘即可完成標記反應。
2. 尤其適合于標記Oligo探針。
3. 能在每個分子的末端標記5-10個左右的標記物。
4. 可用于各種同位素標記和其他任何非同位素標記(80918A,但需自備標記底物,底物包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin- dUTP和aminoallyl-dUTP)、其中80918B和80918C可直接用于生物素和地高辛標記,不需自備標記底物。
5. 通過摻入非標記核苷酸以控制標記的密度,減少空間阻礙,增加靈敏度。
6. 可以用于Southern 和Northern Blot、原位雜交、菌落和斑點印跡雜交等分析。
使用及效果
將0.1-0.2 nmol的DNA(包括Oligo)、4 μL 5×Tailing Buffer A、4 μL 5×Tailing Buffer B、1 μL標記的核苷酸(自備或試劑盒提供)和1 μL TdT末端轉移酶,補水到20 μL,37℃ 保溫15分鐘后放冰上,使用時直接加入到雜交液中。