Western螢光檢測試劑ECL Plus是一種超敏ECL化學發光試劑盒，本產品與二抗上偶聯的辣根過氧化物酶發生化學反應，發出螢光，從而可以通過用X光片壓片或其它適當化學發光成像設備檢測樣品。
Western螢光檢測試劑目前共有三種。常規的Western檢測，優先推薦使用ECL Star。對于豐度比較高的目的蛋白的檢測，例如內參蛋白等的檢測，推薦使用性價比更高的ECL Plus。對于低豐度較難檢測的目的蛋白，優先推薦使用檢測靈敏度最高的ECL Moon。但對于豐度適中的目的蛋白的檢測，不太推薦使用ECL Moon，因為使用ECL Moon時由于檢測靈敏度特別高，容易產生過曝的現象。
ECL Plus靈敏度高，比DAB顯色的靈敏度至少高200倍，比Amersham公司的ECL或以前生產的ECL的靈敏度高20-50倍左右，比Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate的靈敏度高3-100倍。
ECL Plus的發光時間更長。在100微升1微克/毫升辣根過氧化物酶標記IgG中，加入100微升的ECL Plus工作液或Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate工作液進行檢測。在暗房中，兩者均可發出肉眼可見的藍色螢光，但加入ECL工作液的試管內的亮度明顯高很多。最初數分鐘內加入ECL Plus工作液的試管發光強度是加入SuperSignal West Pico Substrate工作液的試管的3倍。約30分鐘后，加入ECL Plus工作液的試管仍然可以發出肉眼可見的較強的藍色螢光，而加入Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate工作液的試管發出的螢光已經很難用肉眼進行分辨，定量結果顯示此時加入ECL Plus工作液的試管發光強度是加入SuperSignal West Pico Substrate工作液的試管的100倍以上(參考圖1)。
圖1. ECL Plus和Pierce公司SuperSignal West Pico效果比較圖。詳細的比較方法如上所述。
ECL Plus的高靈敏度可以大大節省寶貴的樣品以及非常昂貴的一抗和二抗的用量。同時必須注意適當減少一抗和二抗或樣品的用量，以免獲得過深的難以比較灰度的條帶。
ECL Plus和CL Star的檢測效果對比圖參考圖2。
圖2. ECL Plus和ECL Star的檢測效果對比圖。Western檢測過程中僅發光試劑不同，其余完全相同。
ECL Plus采用了全新配方，更加穩定。ECL Plus的兩種試劑37℃水浴孵育30天，和4℃保存的試劑相比，對相同樣品的檢測效果無任何明顯差異。
ECL Plus的背景很低，對PVDF膜和硝酸纖維素膜均適用。PVDF膜(FFP36/FFP39)和硝酸纖維素膜(FFN03)可以向訂購。
包裝清單：
| 產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
| P0018S-1 | ECL Plus A液 | 50ml |
| P0018S-2 | ECL Plus B液 | 50ml |
| — | 說明書 | 1份 |
保存條件：
4℃避光保存，一年有效。37℃避光保存，一個月有效。如果長期不用，可以-20℃避光保存。-20℃可以保存更長時間。
注意事項：
ECL Plus A液和B液在吸取過程中必須要更換槍頭，A液和B液相互污染后會導致A液或B液逐漸失效，影響后續的使用效果。
各溶液使用后，請蓋緊瓶蓋，以防失效。特別是B液，含有氧化劑，比較容易被還原而失效。
ECL Plus的螢光持續時間很長，但開始反應后的30分鐘內螢光更強一些，隨后螢光會逐漸減弱，因此請注意充分利用這螢光較強的30分鐘進行壓片。
在ECL Plus的檢測靈敏度仍不足以滿足實驗需要時，請選擇檢測靈敏度更高的
ECL Plus A液和B液均對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1. Western實驗步驟可以參考官網
2. ECL Plus工作液的配制：等體積混合適量ECL Plus A液和B液，室溫放置備用。工作液宜在臨檢測前配制。
3. Western二抗孵育后，并進行數次洗滌后，用WB專用鑷子(FS035)將膜取出，用吸水紙略吸去過多的液體(切勿接觸膜的蛋白面)，然后置于一潔凈保鮮膜上。
4. 根據膜的大小，按每10平方厘米膜加1ml ECL Plus工作液的比例，滴加ECL Plus工作液到膜上，確保使工作液均勻覆蓋在膜上，放置1-2分鐘。
5. 取膜，棄ECL Plus工作液，用吸水紙略吸去過多的液體。將膜放在兩片保鮮膜中間，隨后進行壓片檢測或化學發光成像儀檢測。
6. 壓片檢測：將膜固定于片夾內。暗室內壓片1分鐘，立即顯影定影，根據結果再調整壓片時間。或直接分別壓片30秒，1、3、5分鐘，然后一起顯影定影觀察結果。
7. 化學發光成像儀檢測：將膜放置到化學發光成像儀內，參考儀器說明書進行檢測。
