一、產(chǎn)品概述:
赭曲霉毒素A是由曲霉菌和青霉屬菌株產(chǎn)生的一種有毒真菌次級代謝產(chǎn)物,廣泛存在于谷物及谷物產(chǎn)品、香料和咖啡豆等產(chǎn)品中。赭曲霉毒素A具有很強的肝臟和腎臟毒性,并有致畸、致突變和致癌作用,嚴(yán)重危害人類健康。赭曲霉毒素一般用薄層色譜、高效液相色譜法檢測,但因其操作繁雜、費用昂貴而影響實際應(yīng)用。而使用赭曲霉毒素ELISA試劑盒則能夠快速而準(zhǔn)確的分析樣品中赭曲霉殘留。
二、適用范圍
赭曲霉檢測試劑盒可定性、定量檢測谷物、飼料、面粉、啤酒、紅酒、飲料等樣本中的赭曲霉毒素。
三、試驗原理
赭曲霉毒素試劑盒采用競爭ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被赭曲霉毒素A抗原,加入樣本及辣根過氧化物酶標(biāo)記的赭曲霉毒素A 抗體。樣本或標(biāo)準(zhǔn)溶液中的赭曲霉毒素A與預(yù)包被在微孔板上的赭曲霉毒素A抗原競爭結(jié)合辣根過氧化物酶標(biāo)記的赭曲霉毒素A 抗體,與樣本或標(biāo)準(zhǔn)溶液中的赭曲霉毒素A結(jié)合的酶標(biāo)抗體在洗滌時被除去,再加入顯色液,讀取吸光度值。樣本的吸光值與其所含殘留物赭曲霉毒素A抗原的含量成負(fù)相關(guān)。對照標(biāo)準(zhǔn)曲線,即可得出相應(yīng)殘留物赭曲霉毒素A的含量。
四、注意事項
1、室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20~25℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。
3、每加一種試劑前需將其搖勻。
4、反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
5、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6、儲存條件
保存赭曲霉毒素試劑盒于2~8℃,不要冷凍,將不用的酶標(biāo)板微孔板放進自封袋重新密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
7、試劑變質(zhì)的跡象
發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。
8、赭曲霉毒素試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
貯藏條件:保存試劑盒于2~8℃。