一、概要
生物素作為酶輔基,催化有機(jī)體羧基化。為此,生物素通過羧基綁定到羧化酶的賴氨酸殘余,二氧化碳結(jié)合生物素氮原子后轉(zhuǎn)移,形成了所謂活躍的二氧化碳。
過去幾年里,人們對(duì)身體健康的意識(shí)和食品營養(yǎng)的興趣顯著提高,消費(fèi)者開始重視營養(yǎng)品維生素含量,為迎合市場(chǎng)制造商將食品維生素化。
當(dāng)生物素缺乏時(shí),就會(huì)出現(xiàn)皮脂溢、皮炎、食欲減退、肌肉疼痛、疲勞和神經(jīng)性疾病。生物素是由人體腸道益群合成,缺乏的癥狀是罕見的,然而過量攝入生雞蛋白會(huì)出現(xiàn)上述癥狀,這可以由生物素結(jié)合親合素來解釋。
二、檢測(cè)原理
生物素(維生素H)定量測(cè)試基于酶聯(lián)免疫吸收分析原理。親合素,對(duì)生物素親和性高,涂在酶標(biāo)板上。樣品生物素和生物素堿性磷酸酶結(jié)合物加到酶標(biāo)板孔中。標(biāo)記的酶和游離生物素競(jìng)爭結(jié)合位點(diǎn)。在室溫下培育一小時(shí)后,用稀釋的洗滌液洗孔,去掉未結(jié)合物。加入培養(yǎng)基溶液,培育30分鐘,變成黃色。加入停止液抑制顏色發(fā)展,ELISA讀取器測(cè)量黃色,生物素濃度間接的和測(cè)試樣品顏色強(qiáng)度成比例。