機體通過酶系統與非酶系統產生氧自由基,后者能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸,引發脂質過氧化作用,并因此形成脂質過氧化物。如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羥基、羰基、氫過氧基或內過氧基,以及新的氧自由基等。脂質過氧化作用不僅把活性氧轉化成活性化學劑,即非自由基性的脂類分解產物,而且通過鏈式或鏈式支鏈反應,放大活性氧的作用。因此,初始的一個活性氧能導致很多脂類分解產物的形成,這些分解產物中,一些是無害的,另一些則能引起細胞代謝及功能障礙,甚至死亡。氧自由基不但通過生物膜中多不飽和脂肪酸的過氧化引起細胞損傷,而且還能通過脂氫過氧化物的分解產物引起細胞損傷。因而測試 MDA的量常常可反映機體內脂質過氧化的程度,間接地反映出細胞損傷的程度。MDA的測定常常與SOD的測定相互配合,SOD活力的高低間接反應了機體清除氧自由基的能力,而MDA的高低又間接反應了機體細胞受自由基攻擊的嚴重程度,通過SOD與MDA的結果分析有助于醫學、生物學、藥理及工農業生產的發展。
產品優點如下:
1、操作簡便:可將試劑混合成單試劑操作,全程約50分鐘,可測48例左右樣本。
2、穩定性好:試劑盒2~8℃存放12個月有效,試劑配制后至少能存放6個月;呈色穩定,顯色后24小時吸光度不變。
3、再現性好:批內CV=2.3%,批間CV=5.34%。
4、回收試驗: X =101.8%。
5、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
6、適用于細胞樣本。
所需儀器及自備試劑:
1、酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為532nm)
2、恒溫水浴箱(孵育溫度為95℃以上)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
培養細胞、細菌: 常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
操作流程:
1、按步驟加入樣本和試劑
2、漩渦混勻,95℃以上沸水浴40分鐘,流水冷卻,然后3500~4000轉/分,離心10分鐘,取上清待測
3、532nm波長,1cm光徑,比色測定各管吸光度值
注:取樣量一般為0.1~0.2ml(樣本量夠直接取0.2ml測定)