儀器分光光度計介紹:
分光光度計則是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進行定性和定量分析。在分光光度計中,將不同波長的光連續(xù)地照射到一定濃度的樣品溶液時,便可得到與眾不同波長相對應的吸收強度。如以波長(λ)為橫坐標,吸收強度(A)為縱坐標,就可繪出該物質(zhì)的吸收光譜曲線。利用該曲線進行物質(zhì)定性、定量的分析方法,稱為分光光度法,也稱為吸收光譜法。用紫外光源測定無色物質(zhì)的方法,稱為紫外分光光度法;用可見光光源測定有色物質(zhì)的方法,稱為可見光光度法。它們與比色法一樣,都以Beer-Lambert定律為基礎(chǔ)。 上述的紫外光區(qū)與可見光區(qū)是常用的。但分光光度法的應用光區(qū)包括紫外光區(qū),可見光區(qū),紅外光區(qū)。
常用的波長范圍為:
(1)200~400nm的紫外光區(qū)
(2)400~760nm的可見光區(qū)
(3)2.5~25μm(按波數(shù)計為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區(qū)。
注意:
1、由于隨機誤差原因,比較法準確度相對于標準曲線法要差一些,另外標準溶液與被測溶液濃度相差太大時有較大誤差。
2、顯色反應與顯色條件