標(biāo)本采集
對(duì)懷疑肺炎支原體感染的患者采集痰、咽拭子、鼻咽洗液和支氣管分泌物。立即送檢和接種。不能及時(shí)接種的標(biāo)本,應(yīng)放置4℃保存并于24小時(shí)內(nèi)接種。
培養(yǎng)條件
支原體的營(yíng)養(yǎng)要求比一般細(xì)菌高,除基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還需加入10%~20%人或動(dòng)物血清以提供支原體所需的膽固醇和酵母。支原體的最適pH 7.8~8.0之間,低于7.0則死亡,但解脲支原體最適pH 6.0~6.5。支原體的培養(yǎng)37℃即可,當(dāng)然,初次培養(yǎng)37℃,5%~10%CO2效果更好。人型,肺炎,24~48小時(shí)即可達(dá)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。
培養(yǎng)方法
分離培養(yǎng)是支原體實(shí)驗(yàn)室診斷的惟一方法。大多數(shù)支原體兼性厭氧,有些菌株在初分離時(shí)加入5%CO2生長(zhǎng)更好。生長(zhǎng)緩慢,在瓊脂含量較少的固體培養(yǎng)基上孵育2~3天出現(xiàn)典型的“荷包蛋樣”菌落(圓形,直徑10~16μm),核心部分較厚,向下長(zhǎng)入培養(yǎng)基,周邊為一層薄的透明顆粒區(qū)。解脲支原體在含尿素和以硫酸錳為產(chǎn)氨指標(biāo)的完全診斷培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,形成具有特征性的深棕色菌落。此外,支原體還能在雞胚絨毛尿囊膜或培養(yǎng)細(xì)胞中生長(zhǎng)。
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