XL1-blue感受態(tài)細胞說明書
【規(guī)格型號】
產(chǎn)品貨號：YS001
產(chǎn)品名稱：XL1-blue感受態(tài)細胞 10× 100ul
【產(chǎn)品說明】
本公司生產(chǎn)的XL1-bluc化學(xué)感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19質(zhì)粒DNA檢測，轉(zhuǎn)化效率高達 107cfu/μg DNA。
【基因型】
endAl gyrA96 thi-1 recAl relA1 lac glnV44F'
[::Tn10 proAB+ laclq A(lacZ)M15]hsdR17(rk -，mk+)
【產(chǎn)品特點】
該菌株用以T7 RNA 聚合酶為表達系統(tǒng)的高效外源基因的蛋白表達宿主。用于表達非毒性蛋白。
【保存條件及有效期】
-70℃保存24個月。
【操作方法】
1，取一支感受態(tài)冰浴融化，加入目的 DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)，輕輕混勻，在冰浴中放置30分鐘。
2，42℃水浴中熱激90秒，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中2分鐘，該過程不要搖動離心管。
3，向每個離心管中加入500 u1無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素)，混勻后置于37℃，200轉(zhuǎn)每分鐘培養(yǎng)1小時，使細菌復(fù)蘇。
4，根據(jù)實驗要求（質(zhì)粒，重組連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化)，吸取不同體積已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞加到含相應(yīng)抗生,素的SOB或LB瓊脂培養(yǎng)基上，將細胞均勻涂開。將平板置于37℃至液體被吸收，倒置平板，37℃過夜培養(yǎng)。
【注意事項】
1，剛剛化凍的細胞,轉(zhuǎn)化效率最高。
2，避免反復(fù)化凍。
3，避免移液槍吹吸。
4，整個操作過程要輕柔。
