- 介紹： 基 因 型F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL (StrR) nupG trfA tonA pcnB4 dhfr簡 要 說 明TG1來源于E. coli K-12菌株，是目前生長速度最快的克隆用大腸桿菌菌株，在平板上37℃，7h可見克隆。主要的噬菌體展示用菌株，同時也可用于普通質粒的構建，lacIqZΔM15的存在使其可以用于藍白斑篩選等實驗；但不含核酸酶endA1突變，體內核酸酶含量較高，提取質粒時推薦使用質粒提取試劑盒中去蛋白液以去除菌體內大量的核酸酶。High5TM系列TG1感受態細胞經特殊工藝制作，經pUC19質粒檢測轉化效率>1×109cfu/μg。
- 操 作 說 明
- 1.EPI400感受態細胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態時迅速插入冰中），加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手撥打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
- 2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
- 3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基（2YT或LB），混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
- 4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
- 5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。
- 注 意 事 項
- 1. 感受態細胞最好在冰上融化。
- 2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
- 3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
- 儲存條件： -80℃
- 用途： 克隆感受態細胞
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