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F-TOP10 感受態(tài)細(xì)胞

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  • 操 作 說 明
  • 1.EPI400感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中),加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
  • 2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
  • 3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
  • 4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
  • 5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
  • 注 意 事 項
  • 1. 感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化。
  • 2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
  • 3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
  • 儲存條件: -80℃
  • 用途: 克隆感受態(tài)細(xì)胞
  • 注意:部分產(chǎn)品我司僅能提供部分信息,我司不保證所提供信息的權(quán)威性,僅供客戶參考交流研究之用。
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